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古树名木经过大自然漫长的历史变迁,是留给人类的宝贵遗产,具有重要的科学、文化和经济价值。为了传承历史文化,留传历史园林植物的宝贵遗传种质资源,本文以北京地区分布的几种重要古树为实验对象,以古树嫩枝及叶片为外植体进行组织培养,以种子萌发培养幼苗等进行快速繁殖,以保护古树优良种质资源;优化树木端粒长度测定方法,并对不同树龄古树端粒长度进行了比较研究。主要研究结果分述如下:1.古树的快速繁殖1.1组织培养:以颐和园两种古树为材料,建立组织培养体系,主要结果如下:1、取桑树当年新生嫩茎切段为外植体,以MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+PVP0.2g/L不定芽启动培养基为;将无菌苗转接到最适分化培养基MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.1mg/L+PVP0.2g/L上,组培苗分化率高;不定根最适诱导培养基为:1/2MS+NAA0.5mg/L+PVP0.2g/L,生根率达100%。2、以古柿树当年新生的嫩芽切段为外植体进行组培快繁,其中不定芽启动培养基为1/2MS+0.8mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+0.5g/L PVP;将无菌苗转接到最适分化培养基1/2MS+5.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+0.5g/LPVP上,组培苗分化效率较高,但小苗矮小。将分化较好的组培苗转接到壮苗培养基1/2MS+2.0mg/LZT+0.1mg/L IAA+0.5g/L PVP,待组培苗长至2-3cm转到生根培养基1/2MS+0.6mg/L NAA+0.3mg/L IBA+0.5g/L PVP,暗培养9~10天后转接到1/2MS+0.5g/L PVP;而组培苗茎段预先用250mg/L的IBA或IAA浸泡2min,生根率可提高10%。1.2种子繁殖从颐和园和植物园采油松、楸树、侧柏和银杏的种子。通过以下操作即可获得小苗:油松种子放在低温冷藏一段时间直接种在基质中,在基质表面覆盖一层薄沙;侧柏通过直接播种保持环境微湿即可;银杏种子放在低温冰箱中冷藏约2月,之后浸泡在水中,放在培养箱中保持暗环境;种子上覆以纱布保湿,两周后开始发芽,之后栽种在基质中可获得小苗。2.不同树龄古树端粒长度的检测真核生物一般都会存在端粒,端粒长杜和细胞的生长分化衰老死亡有着密切的关系;随着年龄的增长,端粒会因为细胞复制而不断缩短直到细胞死亡。树木中端粒会在每一轮细胞周期中缩短一定的长度,因此端粒长度可以用来预测树木的寿命,端粒长度被用来作为体内和离体细胞的寿命的标志。本文参考前人的研究成果,通过调节CTAB提取液中PVP的浓度,改良了基因组DNA的CTAB提取法,获得了高纯度的基因组DNA;然后以楸树为实验材料建立了改良的树木端粒长度测量方法,即基因组DNA30微克,使用HinfI或TaqI识别四碱基的内切酶酶切24-36h,用Southern杂交方法测定端粒长度。对比了不同树种端粒长度和其年龄的关系,结果表明不同的树种端粒长度变化不同,具有树种特异性;银杏、楸树和国槐端粒长度会随着年龄发生变化,而变化规律不同,但油松端粒长度不随年龄而变化或者变化不明显。