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白细胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）是主要由CD4+T淋巴细胞激活所产生的细胞因子之一，在免疫系统外具有广泛的生物学效应，尤其与心血管系统有密切关系。临床上IL-2用于免疫治疗取得显著疗效，但是接受IL-2免疫治疗的患者表现出显著的心血管毒性反应：血管渗漏综合征、低血压、心律失常，心肌梗塞、心肌炎和心肌病亦常见。正是这些严重的心血管毒性反应限制了IL-2在临床的运用。另一方面，越来越多的临床资料报道心血管的病理生理过程中有免疫调节因子IL-2的作用参与，而且IL-2／IL-2R系统与心血管疾病的病情严重程度相关。因此，对IL-2心血管系统作用的研究对于认识IL-2的心血管毒副作用的机制以及防治具有重要意义。但是，到目前为止，IL-2的心血管效应及其机制远未完全阐明。 本课题将在培养心肌细胞、乳头肌、酶解分离的单个心肌细胞、离体心脏和血管等多种模型上，系统研究IL-2的心血管作用，并探讨其作用机制。通过研究，将深入揭示细胞因子IL-2的心血管效应和作用途径，进一步明确IL-2的心血管毒副作用及其相关机制，并为发现可能的预防手段和环节打下基础，具有重要的理论意义和临床指导意义。 目的 1) 分别在培养心肌细胞、乳头肌和离体心脏模型上，系统全面观察IL-2对离体心肌的作用。 2) 研究IL-2的心脏作用是否涉及内源性儿茶酚胺递质机制，以及IL-2对离体心肌细胞的作用机制中是否有NO参与。 浙江大学博士学位论文3) 研究生理浓度的1＊－2对山肾上腺素受体激动剂异丙肾上腺素（枯叩TO比—nd，ISO） 心肌效应的调制作用及其信号途径4)观察铁对IL2舒张血管效应的调制作用，并且探讨相关机制。方法1)Langendorff e流心脏：检测心肌力学指标，心律、心率和冠脉流量等指标；2) 右心室乳头肌模型：检测乳头肌收缩力，收缩间期和舒张间期指标：3)酶解分离的成鼠心室肌细胞模型：观察心肌细胞钙瞬态指标；4)培养的乳鼠心肌细胞：测定心肌细胞日发性搏动频率；5)血管环灌流方法：测定离体大鼠胸主动脉环苯肾上腺素（PE）的收缩效应。结果第一部分：白细胞介素－2的心肌细胞效应1)二．5－200 Uwh的 IL－2浓度依赖性地抑制离体培养的乳鼠心肌细胞搏动频率中值均 ＜0刀5)。热失活1卜2不影响心肌细胞搏动频率（产0刀5）；2) 2．5－200 U／ml IL－2浓度依赖性地抑制离体右心室乳头肌的平均最大收缩力。50 U／ml IL－2 ｛k平均收缩间期缩短，使 1／2平均舒张间期延长。热失活 IL－2，在 0．5－200 U／rnl 的浓度范围内对离体乳头肌收缩未见明显影响；3) IL2 明显增加离体大鼠心脏室性早搏个数（p＜0刀1）；心率从加IL2前的 （276．8仕16．硼）次／分增加为加药后的（296．12t15．42）次／分；左心室发展压从加 IL－2前的（69．30ti4．55）InmHg增加为加药后的（86．25ti9．43） nunHg；左心室舒张末 压从加 IL－2前的（6．22ti．32）mmHg变为加药后的（8．39ti．95）Inmllg；冠脉流量 从加药前的（9．14t0．69）m／mn增加为（11．30ed．89）mljmn；与空白对照组相比 2 浙江大学博士学位论文 显著增加b＜0刀1)。热失活的1卜2无显著增加室性早搏、心率、左室发展压、左室 舒张末压和冠脉流量的作用O值均＞0刀5)。4)Ryanodine＊0－’M)预处理不能减少L上所引起的离体心脏室性早搏个数…＞0．05)； Ryanodine预处理对 IL－2所引起的心率变化无显著影响（p＞0刀5）；Ryanodine预处 理后再加 IL－2，使左心室发展压、左心室舒张末压和冠脉流量在加几－2前后变化 值与单独的L－2组相比显著减小（p＜0．of）。5)Nifedipine（10－’M）预处理明显减少L－2所引起的离体心脏室性早搏（p、0．05人 Nlfedipine预处理对L－2所引起的心率变化无显著影响（p＞0刀5）；Nifedipine预处 理后再加 IL2，使左心室发展压、左心室舒张末压和冠脉流量在加几－2前后变化 值与单独的IL－2组相比显著减小（p＜0．05）。6） 低钙预处理（［Cy］－7．5 X 10‘M）明显减少IL卫所引起的离体心脏室性早搏中＜0．05h 低钙预处理对 IL－2所引起的心率变化无显著影响（p＞0刀5）；低钙预处理后再加 IL－2， 使左心室发展压、左心室舒张末压和冠脉流量在加 IL－2前后变化值与单独的 IL－2 组相比显著减小…值均＜0．05)。第H部分：白细胞介素－2的心脏作用涉及一氧化氮和内源性儿茶酚胺机制1)单独1卜2（刀0＊加1）显著抑制离体培养的乳鼠心肌细胞搏动频率巾值均＜0刀5)。 sxlo－’moUL LNAME 预处理后，心肌细胞搏动频率虽然降低为加药前的 （79．36t5．18）％，但是与加药前相比在统计学上无显著差别（p＞0．05）。再加入 200 ＊h山的IL2后，搏动频率为加药前的（82．22士5刀3）％，与加药前相比在统计学上 无显著差别(p＞0刀5