论文部分内容阅读
目的：探讨hepcidin基因干扰对脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的影响,为脓毒症的发病机制和防治提供一定理论参考。方法：BALB/C雄性6-8周健康小鼠10只,随机均分为实验组(hepcidin基因干扰组,n=5)和对照组(RNA干扰腺病毒组,n=5)。实验组小鼠给予尾静脉高动力注射hepcidin特异性siRNA (small interference RNA)腺病毒,对照组小鼠给予尾静脉高动力注射对照的RNA干扰腺病毒,两组小鼠均自由饮食和活动。13天后,两组小鼠采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture, CLP)法复制脓毒症模型。CLP模型制备24小时后处死小鼠,留取全血和脾脏标本。采用流式细胞术测定脾脏T淋巴细胞亚型CD4+和CD8+的数量百分比；TUNEL法检测脾脏组织细胞的凋亡量；Annexin-V染色流式检测外周血和脾脏T淋巴细胞的凋亡百分比；Western blot法检测脾脏组织凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-9的活化情况。结果：实验组小鼠脾脏CD4+.T细胞百分比明显低于对照组(17.34%vs.29.08%,P<0.05)；实验组小鼠脾脏CD8--T细胞百分比明显低于对照组(8.37%vs.14.57%,P<0.05); TUNEL结果显示实验组小鼠脾脏组织细胞凋亡量比对照组小鼠多；实验组小鼠脾脏T淋巴细胞凋亡率较对照组明显增多(79.3%vs.59.6%,P<0.05),实验组小鼠外周血T淋巴细胞凋亡率较对照组明显增加(93.0%vs.68.9%,P<0.05)；实验组小鼠脾脏组织凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-9活化水平较对照组明显增强(11.97vs.1.54, P<0.05;2.22vs.1.09, P<0.05)。结论：Hepcidin基因干扰引起脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡增加,hepcidin可能在脓毒症中对淋巴细胞的凋亡起一定的抑制作用。