【摘 要】
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目的:1、证实凉血散血法的代表方犀角（水牛角）地黄汤联合青蒿琥酯对ECM小鼠的脑型疟有改善作用;2、基于CM中炎症机制与中医的血热证的相似性以及血管堵塞机制与血瘀证的相似性,将犀角地黄汤拆分为由水牛角、生地黄组成的凉血组与赤芍、丹皮组成的散血组,凉血组对应炎症机制,散血组对应血管堵塞机制,观察拆分组对相应的机制的指标有无干预作用以及对ECM小鼠的症状有无改善作用。方法:84只C57BL/6雌性小鼠
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目的:1、证实凉血散血法的代表方犀角（水牛角）地黄汤联合青蒿琥酯对ECM小鼠的脑型疟有改善作用;2、基于CM中炎症机制与中医的血热证的相似性以及血管堵塞机制与血瘀证的相似性,将犀角地黄汤拆分为由水牛角、生地黄组成的凉血组与赤芍、丹皮组成的散血组,凉血组对应炎症机制,散血组对应血管堵塞机制,观察拆分组对相应的机制的指标有无干预作用以及对ECM小鼠的症状有无改善作用。方法:84只C57BL/6雌性小鼠随机分为六组:正常组（Z组）、模型组（M组）、青蒿琥酯组（Q组）、凉血散血组（X组）凉血组（L组）、散血组（S组）。凉血散血组采用犀角（水牛角）地黄汤,凉血组采用犀角地黄汤中的生地与水牛角,散血组采用犀角地黄汤中的赤芍与丹皮,从感染后第2天开始,除正常组与模型组外,每组腹腔按25mg/kg的浓度注射青蒿琥酯,后三组按照分组灌胃给药0.2ml,每日给药一次,观察感染率、与RMCBS评分（小鼠昏迷及行为量表）,生存率,于感染第7天每组选取9只,取6只摘眼球取血,并取脑组织。以炎症机制中的趋化因子cxcl9、cxcl10以及炎症因子IFN—γ、IL-10、IL-6、TNF-α作为凉血法的主要观察指标,以血管堵塞机制中的重要红细胞黏附受体CD36、TSP-1、TSP-2、作为散血法的主要观察指标,并观测各组脑连接蛋白ZO-1 occludin以及参与两种机制中的ICAM-1、VCAM-1黏附因子的表达情况,3只做脑组织病理学检查。结果:1、RMCBS与生存率、感染率结果:青蒿琥酯组、凉血散血组以及其拆解组合与模型组相比,均能降低ECM小鼠的感染率,延长生存时间与提高RMCBS评分,凉血散血组的ECM小鼠在第11天的RMCBS评分高于青蒿琥酯组（P<0.05）。2、基因表达检测结果:接种后第7天取材脑组织,模型组的脑组织中炎性因子IFN-γ的表达水平明显高于正常组、青蒿琥酯组、凉血散血组以及其拆解组合（P<0.05）。凉血散血组的脑组织中炎性因子IFN-γ的表达水平与青蒿琥酯组相比显著降低（P<0.05）。3、蛋白表达检测结果:正常组的脑组织中紧密连接蛋白ZO-1的蛋白表达水平明显高于模型组、青蒿琥酯组、凉血散血组以及其拆解组合（P<0.05）,说明其余各组的密连接蛋白ZO-1都受到不同程度的损伤。而凉血散血组的ZO-1的蛋白表达水平明显高于青蒿琥酯组与模型组（P<0.05）。4、ELisa检测结果:模型组血液中趋化因子cxcl9和cxcl10的表达水平较正常组、青蒿琥酯组、凉血散血组及其拆分组合显著增高（P<0.05）,青蒿琥酯组与凉血散血组以及拆分组与正常组间未形成明显的差异。结论:1、青蒿琥酯对于炎性机制中的趋化因子cxcl9、cxcl10以及炎性因子IFN-γ的表达具有抑制作用。2、犀角地黄汤联合青蒿琥酯的凉血散血组可有效抑制促炎因子IFN-γ的表达,抑制效果优于单纯使用青蒿琥酯。且犀角地黄汤联合青蒿琥酯对于脑紧密连接蛋白ZO-1的损伤具有保护作用。3、关于凉血组与散血组的拆分,根据本实验的观察,拆分组的疗效并不明显优于青蒿琥酯组,对于相对应的机制未观察到特殊的调节作用,犀角地黄汤作为凉血散血法的代表方,方中诸药作为是联动互因的整体,拆分后反而会减弱其作用。
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