谷氨酰胺是一种重要的氨基酸，它不仅具有重要的生理意义，同时也是一种极有发展前途的新药，因此谷氨酰胺的研究、开发和应用具有重要的意义。 谷氨酰胺高产菌株Corynebacterium glutamicum G32在高铵盐浓度下可以过量积累谷氨酰胺，并且随着铵盐的增加，谷氨酰胺的的产量逐渐增加，而谷氨酸的产量却相应降低，这表明该菌株胞内的氮代谢及调控行为和标准株Corynebacterium glutamicum13032有很大的差异，我们希望利用双向电泳，分析差异蛋白表达找到C．glutamicum G32对外界铵离子水平改变应答方面的差异，同时结合对有机酸的测定，加深对该菌氮代谢的认识。 通过对不同铵离子水平下的发酵数据分析，高铵离子水平下，菌株的生长速率以及糖代谢速率，谷氨酸的产率低于低铵离子水平，而谷氨酰胺的产率则要高于低铵离子水平。 谷氨酸脱氢酶（GDH）、谷氨酰胺合成酶（GS）、谷氨酸合酶（GOGAT）是氨同化途径中的重要酶。研究了不同氮源水平下三种酶的比酶活变化情况。结果显示在高氮源条件下GS以及GOGAT的比活力反而要高于低氮源条件下，改变pH对三个酶的比活力并没有明显影响。GDH的比活力很高，这表明了GDH在联系碳代谢和氮代谢方面的重要作用。 分析G32在高氮和低氮培养基上的差异蛋白图谱，G32在高氮情况下糖酵解途径受到抑制，磷酸戊糖途径PPP途径加强，三羧酸TCA循环酮戊二酸前面的途径加强，而酮戊二酸后面的苹果酸脱氢酶加强，延胡索酸水化酶减弱，乳酸脱氢酶表达上升，细胞生长相关蛋白的表达明显低于低氮情况下，其它氨基酸代谢途径中的蛋白也相应上调，在发酵后期，应对环境压力的蛋白上调，暗示此时由于还原氧的增加导致细胞衰亡。 对谷氨酰胺合成酶基因glnA，glnA2以及中心调控因子amtR的测序结果表明，与标准菌株C．glutamicum13032相比，glnA虽然有7个核苷酸突变，但其编码的蛋白仅仅是第47位的氨基酸由Ile变为Val，对酶活影响不大，而glnA2由于存在两个插入突变，因此所编码的蛋白与标准菌株大为不同，而且可能影响与其处于同一操纵子上的glnE的表达。amtR有五个核苷酸发生了突变，其编码的蛋白质则有四个氨基酸发生了变化，这些突变很可能导致AmtR蛋白对菌株的氮代谢基因转录的抑制被削弱。