论文部分内容阅读
癌症的治疗一直是医学上难以攻克的难题。传统的全身给药治疗方式虽然可以杀死部分肿瘤,但同时也会给身体健康带来极大的危害。将抗癌药物装载于纳米载体中进入人体组织循环,并最终在肿瘤部位释放,可以有效降低抗癌药物对人体正常组织的伤害,同时大大提高药物利用率。纳米载体中空介孔二氧化硅纳米粒子(HMSS)因其高的比表面积和大的孔容积,表面易于修饰及其良好的生物相容性等特点近年来成为生物医学领域研究的热点。本文构建了以碳酸酐酶IX(G250)为靶向剂的空心介孔二氧化硅纳米粒子靶向药物运输系统。通过二硫键将G250抗体和HMSS纳米粒子链接,选用模型药物阿霉素(Doxorubicin,DOX)对其进行药物负载后,借助G250抗体和肿瘤细胞表面高表达的G250抗原之间的特异性结合达到HMSS粒子对肿瘤细胞的主动靶向作用,载药粒子最终密集在肿瘤细胞,由于肿瘤细胞高浓度的谷胱甘肽氧化还原作用,二硫键断裂,从而将药物释放。主要结果如下所示。(1)制备了HMSS纳米粒子。使用阳离子表面活性剂十六烷基三甲基氯化铵(CTAC)作为模板剂,利用碳酸钠(Na2CO3)碱性刻蚀法制备了HMSS,表征结果显示,HMSS纳米粒子的BET比表面积为998.27m2/g,孔体积为1.43cm3/g,空腔结构完整,分散性好。(2)制备了G250抗体修饰的靶向HMSS纳米粒子。将G250抗体通过二硫键链接到HMSS粒子表面,利用G250抗体与G250抗原特异性结合的特点,实现对肿瘤细胞的主动靶向。(3)确定了DOX的浓度和吸光值之间的线性关系,并依据DOX标准曲线方程对HMSS纳米粒子的最大药物负载量及其对应的包封率进行了计算,结果显示,HMSS纳米粒子的最大载药量为1001mg/g,包封率为77%。(4)分析了HMSS@DOX在不同pH值溶液环境下的药物释放量,讨论了DOX的释放量和释放率与释放体系中pH值的关系。随着pH值的降低,DOX的释放量和释放率增大。(5)观察了HMSS-S-S-G250@FITC和HMSS-S-S-G250@DOX纳米粒子的细胞内吞效果。以4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色的细胞核为参考,对不同浓度的HMSS-S-S-G250@FITC和HMSS-S-S-G250@DOX纳米粒子进入Hela细胞中的数量进行了分析讨论。结果显示细胞对粒子的内吞量随着粒子浓度的增大而增大。(6)计算了不同浓度不同种类的纳米粒子与Hela细胞共培养后的细胞存活率,依据该数据分别对HMSS、HMSS-SH、HMSS-S-S-Py、HMSS-S-S-G250、HMSS-SH@DOX和HMSS-S-S-G250@DOX纳米粒子的细胞毒性进行了对比分析。结果显示HMSS、HMSS-SH、HMSS-S-S-Py、HMSS-S-S-G250纳米粒子具有较好的生物相容性,HMSS-S-S-G250@DOX纳米粒子具有最大的细胞毒性。