论文部分内容阅读
目的：本实验使用大肠杆菌K-12COL+来提取大肠杆菌素E2、嗜酸乳杆菌提取嗜酸乳杆菌素,探讨两种提取物对致病性大肠杆菌及耐药性大肠杆菌的体外抗菌效果；制作致病性大肠杆菌尿路感染家兔模型及耐药性大肠杆菌尿路感染家兔模型,观察该两种细菌素对两种细菌感染模型的效果。方法：第一部分使用硫酸铵沉淀法提取大肠杆菌素E2和嗜酸乳杆菌素,使用Yang的方法提取大肠杆菌素E2和嗜酸乳杆菌素。并用SDS-PAGE胶确定其分子量来鉴定。第二部分使用Kirby-Bauer(K-B)纸片扩散法进行细菌药敏实验,确定提取物的最佳抑菌浓度。第三部分制作家兔尿路感染模型,将30只家兔分为五组,A组对照组、B组致病性大肠杆菌使用大肠杆菌素E2治疗、C组致病性大肠杆菌使用嗜酸乳杆菌素治疗、D组耐药性大肠杆菌使用大肠杆菌素E2治疗、E组耐药性大肠杆菌使用嗜酸乳杆菌素治疗。分别在1、3、5、7、10天取尿液进行平板培养基培养计数,观察大肠杆菌素E2和嗜酸乳杆菌素对致病性大肠杆菌和耐药性大肠杆菌的治疗作用。结果：(1)第一部分使用硫酸铵沉淀法能成功提取大肠杆菌素E2和嗜酸乳杆菌素,并从SDS-PAGE胶上清楚的看到其泳带；使用Yang的方法能成功提取大肠杆菌素和嗜酸乳杆菌素,并从SDS-PAGE胶上清楚的看到其泳带。(2)第二部分使用K-B法将大肠杆菌素E2的最佳抑菌浓度检测为64mg/ml嗜酸乳杆菌素的最佳抑菌浓度检测为8mg/ml。(3)第三部分使用PH3的稀盐酸5m1经导尿管注入家兔膀胱5分钟可成功建立家兔尿路感染模型。大肠杆菌素E2和嗜酸乳杆菌素对致病性大肠杆菌和耐药性大肠杆菌经膀胱灌注后接尿涂板进行SPSS统计分析,其P<0.05,差异有统计学意义。结论：本实验使用硫酸铵沉淀法和Yang的方法能成功提取出大肠杆菌素E2和嗜酸乳杆菌素。通过体外抑菌试验和动物实验结合分析大肠杆菌素E2对致病性大肠杆菌和耐药性大肠杆菌的抑菌效果,结果显示均有良好的抑菌效果,嗜酸乳杆菌素对致病性大肠杆菌抑菌效果较好,而对耐药性大肠杆菌无抑菌效果。