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目的:通过腹腔注射环磷酰胺建立小鼠间质性膀胱炎(IC)模型,研究小鼠IC模型中Toll样受体4/p38丝裂原活化蛋白激酶(TLR4/p38 MAPK)信号通路的表达情况,为研究TLR4/p38 MAPK信号通路是否可作为IC治疗靶点提供实验依据。方法:C57BL/6J雌性小鼠60只,随机分为IC组(n=30)和对照组(n=30)。IC组小鼠分别于第1、3、5、7天腹腔注射环磷酰胺(100mg/kg)建模,对照组小鼠分别于第1、3、5、7天腹腔注射等量生理盐水作为空白对照。于第8天时观察两组小鼠的刻板行为,统计刻板行为评分。于第9天时统计两组小鼠的排尿次数并分析两组小鼠之间排尿次数的差异。统计完成后将小鼠处死,取膀胱组织进行下列实验:1.通过苏木精-伊红染色(HE染色)观察小鼠IC模型病理学特征;2.通过甲苯胺蓝染色对比两组小鼠膀胱组织中肥大细胞浸润程度;3.通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测两组小鼠膀胱组织匀浆的上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;4.通过免疫印迹试验(Western blot)检测TLR4/p38MAPK信号通路相关蛋白(TLR4、p-p38 MAPK、p38 MAPK、IL-1β、IL-6、TNF-α)的表达水平;5.通过实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测TLR4、p38 MAPK、IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA表达情况。应用Graph Pad Prism 6软件绘制统计结果图,应用IBM SPSS 25.0统计分析软件进行数据处理。结果:1.IC组小鼠刻板行为评分较对照组小鼠明显升高,评分的差异具有统计学意义(p<0.05)。2.IC组小鼠排尿次数较对照组小鼠明显增多,排尿次数的差异具有统计学意义(p<0.05)。3.HE染色可见IC组小鼠膀胱上皮组织明显损伤,局部粘膜出现剥脱,部分上皮细胞出现胀大、空泡样改变,粘膜下层可见大量红细胞及炎性细胞浸润。4.甲苯胺蓝染色可见IC组小鼠膀胱组织肥大细胞计数较对照组明显增多(p<0.05)。5.ELISA检测结果显示IC组小鼠膀胱组织匀浆的上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α的含量明显高于对照组,其差异具有统计学意义(p<0.05)。6.Western blot检测结果显示,TLR4/p38 MAPK信号通路相关蛋白TLR4、p-p38 MAPK/p38 MAPK、IL-1β、IL-6、TNF-α在IC组小鼠膀胱组织中表达水平明显高于对照组小鼠膀胱组织(p<0.05)。7.q RT-PCR检测结果显示,与对照组相比,IC组小鼠膀胱组织中TLR4、p38 MAPK、IL-1β、IL-6和TNF-αm RNA的表达显著升高(p<0.05)。结论:1.通过腹腔注射环磷酰胺可以成功构建小鼠IC模型。IC组小鼠的刻板行为评分及排尿次数均显著高于对照组,且IC组小鼠膀胱组织病理可见大量红细胞及炎性细胞浸润。2.在IC组小鼠中,TLR4/p38 MAPK信号传导通路相关分子TLR4、p38MAPK、IL-1β、IL-6和TNF-α的基因与蛋白高表达,说明该通路在IC的发病过程中发挥重要作用。