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小麦叶锈病是小麦生产上的重要病害之一，筛选和培育抗病品种已被公认为是防治该病害最经济、安全、有效的途径。持续不断地研究、发掘和标记抗叶锈病基因是今后一项长期而且重要的任务。Lr19定位于7DL上，是一个十分有效的抗叶锈病基因，自1966年首次将该基因从长穗偃麦草转到普通小麦中，至今仍是一个应用潜力很大的抗病基因，寻找更多的与Lr19连锁的分子标记，对于构建密集的遗传图谱及该基因的分离具有重要意义。SRAP（sequence-related amplified polymorphism）技术是一种基于PCR的新型标记系统，具有RFLP、RAPD、SSR、AFLP标记的优点，又克服了他们的缺点，有效可靠，简单经济。本文首次将SRAP技术应用到小麦叶锈病的研究中，根据Li等的程序加以修改，确定小麦基因组的SRAP扩增程序，即94℃预变性5min，接着94℃变性1min，35℃退火1min，72℃延伸1min，共5个循环；然后将退火变为50℃，再进行30个循环，最后72℃延伸10min，4℃保存。在此程序的基础上通过改变Taq酶、dNTPs、引物的浓度，建立并优化了小麦基因组SRAP的扩增体系，即在20μL总体系中，DNA（20ng／μL）2μL，10×buffer 2μL，dNTPs（10mMol／L）0.7μL，Taq酶（5U／μL）0.3μL，Primer（50ng／μL）各为0.8μL，其余用PCR水补齐。该体系稳定可靠，适合于小麦基因组的研究。研究采用SRAP技术对23个以Thatcher为遗传背景的小麦抗叶锈病近等基因系和感病对照Thatcher进行了多态性分析。从128对引物中筛选得到41对多态性引物，每个引物组合产生6～41个多态性条带，共产生537个多态性条带，多态性条带率达49.5％，平均每个引物组合产生13.1个多态性条带；每个引物组合产生1～13个特异性条带，共产生115个特异性条带，特异性条带率为10.6％，平均每个引物组合产生2.8个特异性条带。聚类分析将23个小麦抗叶锈病近等基因系和Thatcher在相似系数0.72处分为A、B两大类，其中96％的个体归入B类。B类又分为Ⅰ、Ⅱ两个亚类，95％的个体聚在第Ⅱ亚类。第Ⅱ亚类在相似系数为0.785附近分为4小类。在23个小麦抗叶锈病近等基因系和感病对照Thatcher多态性分析的基础上，选取456株TcLr19与Thatcher杂交的F2代植株为材料，开展了小麦抗叶锈病基因Lr19的SRAP分子标记研究，获得一个与Lr19抗病基因连锁的分子标记M73，距目的基因2.6cM。为分子辅助育种、构建密集的遗传图谱和最终实现Lr19基因的克隆奠定基础。对标记M73进行克隆测序，经BLAST比较，发现该标记序列与Triticum turgidum HMW-glutenin locus部分序列同源性达86％，与Triticum aestivum BAC文库中克隆1031P08，754K10，1344C16的部分序列同源性达86％，与小麦NBS-type putative resistance protein部分序列同源性45％。通过本实验的探讨，证明SRAP技术在小麦抗叶锈病基因标记及基因克隆研究中应用的可行性。