醋制南五味子抗糖尿病物质基础研究

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五味子为木兰科植物五味子(Schisandra chinensis Baill.)和华中五味子(Schisandrasphenanthera Rehd.et Wils.)的干燥成熟果实,临床用于久嗽虚喘、梦遗滑精、遗尿尿频、久泻不止、自汗、盗汗、津伤口渴、气短脉虚、内热消渴、心悸失眠等症。五味子用于临床常用醋制品,研究表明五味子具有抗糖尿病的作用,为阐明其抗糖尿病物质基础,本论文将进行以下实验研究。  目的:筛选南五味子抗糖尿病的最优品种,进一步阐明其醋制后抗糖尿病物质基础。  方法:  (1)采用紫外分光光度法和高效液相色谱法对五味子与南五味子的化学成分、抗氧化活性和组织代谢差异进行比较。  (2)采用系统提取分离法和系统溶剂萃取法对南五味子成分进行分离。利用紫外分光光度法对各化学部位的化学成分及体外活性进行测定。  (3)利用链尿佐菌素复制小鼠糖尿病模型,采用断尾法测定血糖值评价糖尿病模型,比较各化学部位对糖尿病小鼠的影响。  (4)采用高效液相色谱法比较石油醚活性部位化学成分在各组织中的分布。  (5)采用液相-质谱联用,鉴定活性成分,阐明物质基础。  结果:  (1)南五味子和五味子总三萜类含量、总木脂素和总有机酸分别为23.25%、22.25%;7.43%、12.77%;10.15%、23.41%。在体外抗氧化活性方面,南五味子和五味子抑制α-葡萄糖苷酶和DPPH自由基的IC50分别为0.025 mg·mL-1,0.035 mg·mL-1;0.591mg·mL-1,0.638 mg·mL-1。  (2)醋制南五味子石油醚和氯仿部位主要以萜类(83.10%、30.20%)和木脂素类(11.99%、31.12%)成分为主,水部位主要以多糖(40.74%)为主,而正丁醇部位主要以鞣质(10.35%)为主。醋制南五味子石油醚部位、氯仿部位、正丁醇部位和水部位抑制α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、清除氢基自由基、羟基自由基的IC50结果分别为,0.132 mg·mL-1、9.322μg·mL-1、0.306 mg·mL-1和8.86 mg·mL-1;0.276 mg·mL-1、7.248μg·mL-1、0.232 mg·mL-1和3.212 mg·mL-1;0.192 mg·mL-1、30.624μg·mL-1、0.226 mg·mL-1和1.166 mg·mL-1;0.204 mg·mL-1、63.104μg·mL-1、0.598 mg·mL-1和0.558 mg·mL-1。  (3)通过对STZ糖尿病小鼠每周血糖、胰岛素的测定结果可知:模型组与空白组相比明显升高(p<0.01),各给药组均能降低血糖、提高胰岛素含量,从而增强小鼠糖耐量,但以石油醚和氯仿组效果明显。小鼠血清中的HDL-C,GOT,GPT,TG,T-CHO,模型组比正常组显著升高(p<0.01),各给药组中以石油醚组、氯仿组效果明显。空白组肝组织中MDA和SOD含量与模型组相比具有差异(p<0.05),石油醚与氯仿组与模型组比较均有显著差异(p<0.01);其它组无明显变化。  (4)石油醚部位高效液相色谱图显示有47个色谱峰,其中20号峰(五味子甲素)在血清和各组织中均有显示,其它在各组织中分布不均,其中以肝脏、肾脏和血液中的成分最多,脑中最少,其它脏器次之。  (5)液质联用结果显示含药肝组织中原型成分为五味子甲素和五味子甲、乙(丙)和丁酯。  结论:石油醚和氯仿部位是醋制南五味子抗糖尿病的活性部位,石油醚和氯仿部位以木脂素类和萜类成分为主。
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