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背景脂代谢异常的实质是脂蛋白和载脂蛋白的异常，对致动脉粥样硬化来说脂蛋白的作用要甚于胆固醇。载脂蛋白作为脂蛋白中的蛋白质部分，不仅在结合和转运脂质、稳定脂蛋白的结构上发挥重要作用，而且还具有调节脂蛋白代谢关键酶的活性，参与脂蛋白受体的识别的作用，它参与了人体脂类代谢的全过程。20年前鉴定发现了已知在脂代谢中有重要作用的大多数载脂蛋白，他们中的9个(APOA1，APOA2，APOA4，APOB48，APOB100，APOC1，APOC2，APOC3，和APOE)是与脂蛋白调节最相关的。还有一些载脂蛋白是最近才发现的，它们在脂蛋白代谢中的作用仍是未知的。载脂蛋白A5(APOA5)是在2001年通过蛋白组学技术发现的一个新的载脂蛋白家族成员，被认为是在甘油三酯(TG)生物学的一个重大发现。研究载脂蛋白A5的等位基因1131T＞C和19S＞W发现，与1131T携带者和19S携带者相比，1131C携带者和19W的携带者有较高的血清甘油三酯浓度。载脂蛋白多态性研究显示APOA5具有降低血浆甘油三酯的调脂保护作用，但因为它的血浆浓聚物大约只是其它载脂蛋白(如APOA1和APOA2)的千分之一，所以APOA5的关联性和功能不能直接充分地被发现。最近的一些研究认为，APOA5降低甘油三酯是通过脂蛋白脂肪酶(LPL)的激活和加速极低密度脂蛋白(VLDL)的分解代谢实现的，对人类APOA5基因的进一步研究发现，一些转录因子(如PPARa，RORa，LXR和SREBP-1c等)有调节其降脂的作用。贝特类调血脂药经典的作用是降低甘油三酯，其调控脂代谢相关基因表达主要是通过PPARa实现的，APOA5是否参与了贝特类药物调节甘油三酯的作用，其具体作用机制如何，是否与PPAR-α的调节有关，目前国内外报道甚少。对APOA5调节脂代谢的机制深入研究，将为改善脂代谢异常提供新的途径，对冠心病等心血管疾病的一级预防提供新的思路。目的：1．通过复制高甘油三酯血症的动物模型，并用不同剂量的非诺贝特(贝特类药物)进行干预，分析非诺贝特对大鼠肝脏APOA5mRNA表达的影响及APOA5与LPL活性、PPAR-α及血脂各项指标的关系，旨在探讨APOA5在贝特类药物调脂中的作用机制。2．通过检测冠心病患者血清APOA5以及其他血脂、脂蛋白水平，探讨血清APOA5水平与血脂及冠心病的相关性，进一步探讨APOA5调节血脂的机制及其在冠心病发病中的作用。研究方法(分为两部分)：①基础研究部分：40只雄性wister大鼠，用普通饲料适应性喂养1周，颈静脉窦采血测定基线血清TC、TG(以酶法测定)HDL-C、LDL-C水平(以直接匀相法测定)均在全自动生化分析仪上进行，随机分为4组(对照组、高脂组、非诺贝特低剂量组和非诺贝特高剂量组)，对照组饲以普通饲料，其余3组饲以高脂饲料。分组喂养4周后再次抽血测定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C等指标。然后给予药物干预，对非诺贝特高、低剂量组每日分别以非诺贝特100mg／kg，35mg／kg灌胃，其余组以生理盐水灌胃。药物干预4周后，第3次取血检测TC、TG、HDL-C和LDL-C，用比色法测定LPL活性，处死大鼠，取肝脏抽提mRNA并应用RT-PCR检测APOA5及PPAR-α表达情况，制备肝匀浆测定TC和TG(测定方法同上)，比较APOA5与各项指标的相关性。②临床研究部分：选择经冠状动脉造影证实的67例冠心病患者和107例健康对照者为研究对象，均在清晨空腹自肘静脉采血5ml，留取血清。其中1ml血清于-80℃保存用于APOA5和脂联素的测定，其余血清当日送检验科用全自动生化仪进行血脂、脂蛋白和血糖检测。APOA5的测定方法是先用离心浓缩机系统浓缩血清，而后采用ELISA法测定；脂联素的测定采用ELISA法。系统分析血清APOA5水平、脂联素水平与血脂、脂蛋白的相关性。③统计学处理：全部数据用SPSS13.0统计软件处理，所有数据以(?)±s表示，组间比较用方差分析，两组间比较用LSD检验。APOA5与各指标间比较用相关性分析。结果：1．基础部分：(1)不同处理组间血脂水平在基线时测定值均无统计学差异。分组喂养4周后高脂组及非诺贝特高、低剂量组的血清TC、TG和LDL水平较基线测定值及正常对照组升高，而HDL降低(p＜0.05)；正常对照组与基线测定值比较没有明显变化。(2)药物处理4周后，高脂组大鼠的血清TG、TC较药物处理前明显升高(p＜0.01)，并较正常对照组大鼠明显升高(p＜0.01)，而预先给予非诺贝特高、低剂量均显著降低已形成高脂血症大鼠的血清TG水平(p＜0.05)，成剂量依赖性，并且不同程度的降低血清TC、LDL水平及升高HDL，在肝脏匀浆中也表现出相同的结果。(3)高脂组大鼠的肝脏APOA5mRNA表达较正常对照组大鼠下降(p＜0.01)，而非诺贝特则显著增加高脂血症大鼠的肝脏APOA5及PPARα的mRNA表达，并显著增加血浆LPL的活性，呈剂量依赖性。非诺贝特高剂量组的血清TG，APOA5和PPARα的mRNA表达及LPL活性均与正常对照组没有明显差异。(4)APOA5mRNA表达与血清和肝匀浆中TG含量变化呈明显负相关(p＜0.01)，APOA5与PPARαmRNA表达呈正相关(p＜0.01)，APOA5与血清LPL活性呈正相关(p＜0.05)。APOA5与血清及肝匀浆TC含量、HDL、LDL无明显相关性(p＞0.05)。2．临床实验：①与对照组比较，冠心病组的APOA5及APN水平明显降低；TC、TG和LDL-C均明显升高(p＜0.01或p＜0.05)；而HDL-C、Glu水平没有显著性差异(p＞0.05)。②将CHD患者分为高TG组和正常TG组后进行分析，结果显示两组CHD患者的血清APOA5值都明显低于正常对照组(p＜0.01)，而且CHD高TG组血清APOA5还明显低于CHD正常TG组(p＜0.01)；两组CHD患者血清ANP值都明显低于对照组的血清ANP值(p＜0.01)，而且CHD高TG组血清ANP还明显低于CHD正常TG组(p＜0.05)。③把全部研究对象按血脂水平分组比较发现：与正常TG组比较，高TG组的APOA5浓度明显的降低(p＜0.01)；而高TC组和正常TC组间APOA5浓度无统计学差异。④血清APOA5水平与脂联素呈显著正相关(p＜0.01)，与血清TG、LDL之间呈显著负相关(p＜0.01和p＜0.05)：血清脂联素与TG、TC呈显著负相关(p＜0.01)，血清脂联素水平与血清HDL呈正相关(p＜0.05)。结论：1．非诺贝特能够诱导肝脏PPARα和APOA5 mRNA表达量增高，呈剂量依赖性。非诺贝特调控血脂至少部分是通过PPARα调控APOA5实现的。APOA5基因表达与LPL的活性有明显的相关性。APOA5基因的表达是影响血清TG代谢的重要因素。因此推测APOA5在非诺贝特调节血脂过程中有重要的中介作用。2．APOA5是TG代谢的重要调节因子之一。血清APOA5水平降低可能是冠心病的危险因素。血清APOA5与血清脂联素水平呈明显的正相关，推测APOA5与脂联素在冠心病发病过程中有协同作用，APOA5与脂联素在作用机制上可能有一定的联系。