家蚕天然膜蛋白Bmb019518的分离纯化

来源 :浙江理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:litian
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
膜蛋白(特别是膜内在蛋白)在生物体与外界环境进行物质和能量的交换以及信号传递等方面起着非常重要的作用。各种不同的质膜蛋白在生物膜上以通道蛋白或载体蛋白等形式存在,是维持体内稳定内环境的重要通道。它们不仅是调节细胞新陈代谢的重要参与者,而且在电子传递链中也有着重要的作用。膜蛋白约占细胞总蛋白的1/3左右,并且大部分膜蛋白是研究新药的潜在靶点,是新药研发的重要领域之一。   天然内膜蛋白存在于生物膜的脂类环境中,大多为疏水性的蛋白,应用常规蛋白纯化方法难以将其纯化。本文以家蚕杆状病毒感染的蚕蛹为材料,通过感染初期病毒出芽将宿主细胞的细胞膜剥离产生囊膜病毒,经过匀浆、差速离心、密度梯度离心获得带囊膜病毒后,利用高压破碎和超速离心等一系列技术手段而获得较纯的膜结构后,采用两性离子去垢剂(CHAPS)提取膜蛋白,利用AKTAexplorer10蛋白纯化系统进行离子交换层析和凝胶过滤层析来分离家蚕膜蛋白,获得的蛋白样品经过双向电泳进一步分离后,通过MAIDI-TOF-MS获得一种家蚕膜蛋白的肽质量指纹图谱(Peptide Mass Fingerprinting,PMF),利用PLGS Browser软件搜索家蚕蛋白质理论数据库来分析鉴定纯化的蛋白。经过质谱鉴定证实我们获得了一个具有一次跨膜的家蚕膜蛋白,为西南农大蛋白库编号Bmb019518蛋白。利用病毒出芽方式获得纯的宿主细胞膜的方法是一次全新的尝试,这为研究膜蛋白提供了一个有效的膜蛋白分离技术,并为进一步研究膜蛋白的结构和功能奠定基础。
其他文献
燃料电池以其高效率、高能量密度、零排放、快速启动等优点,被誉为21世纪最具有发展前景的高效清洁发电技术。由于目前研究的直接甲醇燃料电池存在阳极催化剂性能低、易中毒、
相变材料特别是铁电材料是一种具有广阔应用前景的功能材料。铁电性质的研究是当今国际上的热门研究领域之一。近期研究表明,有机-无机杂化化合物表现出良好的固态电性能,如铁
我印象最深的是丁寺钟画婺源早春山间的一个瞬间。山雨欲来,大地被黑色笼罩着。所有沉浸其中的事物,像是要被饱含重量的沉郁压垮。看!一束光刺破乌云,照亮下面一块油菜田。田
为解决目前广泛应用的糠醛丙酮体系环氧灌浆材料中糠醛毒性大、易挥发及刺激性强等问题,本论文采用了两种方案:1)采用糠醛与含α-H的脂肪族醛进行羟醛缩合反应,合成一种结构类似