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小麦禾谷孢囊线虫(cereal cyst nematode,CCN)是一种发生在小麦、荞麦等禾本科作物上的植物线虫,在山东省为害日益加剧,对我省粮食安全造成重大威胁。本研究首先对山东省的9个地级市展开小麦孢囊线虫的冬前侵染调查;进一步利用形态学和双重PCR技术对山东省单县禾谷孢囊线虫群体进行种类鉴定;最后开展了6个小麦品种对禾谷孢囊线虫的抗性鉴定。研究结果如下:
1、山东省的9个地级市展开小麦孢囊线虫的冬前侵染调查:
分别于2017年和2018年12月上旬,对山东省部分地区的CCN小麦病田进行抽样调查,采集样本数分别是74份、80份。结果显示:2017年,潍坊、淄博、菏泽、聊城、青岛、德州、滨州等7市中检测出CCN的2龄幼虫(J2)的孵出,各地累加J2孵出病田率为90.5%。在潍坊、菏泽、聊城、青岛、德州、滨州等6市中发现有CCNJ2对小麦根系的侵入,各地累加J2侵入率为64.9%。菏泽的雌虫形成率为6.25%,各地累加雌虫形成率为2.7%;
2018年,青岛J2的孵出率为94.7%,滨州、德州、菏泽、济南、济宁、潍坊、淄博J2的孵出率为100%,各地累加J2孵出病田率为98.8%。在德州、菏泽、济南、济宁、聊城、青岛、潍坊等7市中发现J2对小麦根系的侵入,各地累加J2的侵入病田率为68.8%。在青岛和潍坊的部分小麦病田中检测到3龄幼虫(J3)和4龄幼虫(J4),各地累加J3J4发育率为23.4%。在青岛部分病田中发现少量白色雌虫,各地累加雌虫形成率为1.3%。
2、山东省单县禾谷孢囊线虫群体的种类鉴定:
根据冬前侵染调查结果显示,山东单县与被调查的其它地区相比有J3和J4的发生且侵染数量较多,符合菲利普孢囊线虫的发生规律,而2018年以前山东省尚未发现菲利普孢囊线虫的发生。因此,对单县禾谷孢囊线虫群体进行种类鉴定。通过形态学和分子生物学,确定了山东省单县小麦孢囊线虫群体中有燕麦孢囊线虫和菲利普孢囊线虫两种。
从形态上看,燕麦孢囊线虫阴门锥是双半膜孔型,无下桥结构,菲利普孢囊线虫阴门锥也是双膜孔型,有下桥结构。菲利普孢囊线虫的成熟孢囊虫体较大,孢囊长度在703.5-765.4μm左右,而燕麦孢囊线虫长度相对短,长度为607.1-689.3μm。菲利普J2比燕麦孢囊J2线虫而言长度略短,在579.7-627.6μm范围内;
采用双重PCR技术对单孢囊DNA进行扩增,获得了长度为320bp和200bp的序列,分别与GenBank中已经登录的菲利普孢囊线虫和燕孢囊线虫的序列相似性达99%,进一步确认采样区单县的线虫包括燕麦孢囊线虫和菲利普孢囊线虫两种。
3、小麦品种对禾谷孢囊线虫抗性鉴定:
室外小麦抗性鉴定的盆栽试验结果表明:在6个小麦品种中,济麦22、山农28、潍麦8号、烟农对CCN胶州群体表现为感病,各品种间的感病程度不一致。山农15和济南17对CCN胶州群体表现为抗病;济南17既没有抑制CCNJ2的孵化,也没有抑制CCNJ3和J4发育,其品种抗性类型属于抗繁殖(抗雌虫形成)类型。
1、山东省的9个地级市展开小麦孢囊线虫的冬前侵染调查:
分别于2017年和2018年12月上旬,对山东省部分地区的CCN小麦病田进行抽样调查,采集样本数分别是74份、80份。结果显示:2017年,潍坊、淄博、菏泽、聊城、青岛、德州、滨州等7市中检测出CCN的2龄幼虫(J2)的孵出,各地累加J2孵出病田率为90.5%。在潍坊、菏泽、聊城、青岛、德州、滨州等6市中发现有CCNJ2对小麦根系的侵入,各地累加J2侵入率为64.9%。菏泽的雌虫形成率为6.25%,各地累加雌虫形成率为2.7%;
2018年,青岛J2的孵出率为94.7%,滨州、德州、菏泽、济南、济宁、潍坊、淄博J2的孵出率为100%,各地累加J2孵出病田率为98.8%。在德州、菏泽、济南、济宁、聊城、青岛、潍坊等7市中发现J2对小麦根系的侵入,各地累加J2的侵入病田率为68.8%。在青岛和潍坊的部分小麦病田中检测到3龄幼虫(J3)和4龄幼虫(J4),各地累加J3J4发育率为23.4%。在青岛部分病田中发现少量白色雌虫,各地累加雌虫形成率为1.3%。
2、山东省单县禾谷孢囊线虫群体的种类鉴定:
根据冬前侵染调查结果显示,山东单县与被调查的其它地区相比有J3和J4的发生且侵染数量较多,符合菲利普孢囊线虫的发生规律,而2018年以前山东省尚未发现菲利普孢囊线虫的发生。因此,对单县禾谷孢囊线虫群体进行种类鉴定。通过形态学和分子生物学,确定了山东省单县小麦孢囊线虫群体中有燕麦孢囊线虫和菲利普孢囊线虫两种。
从形态上看,燕麦孢囊线虫阴门锥是双半膜孔型,无下桥结构,菲利普孢囊线虫阴门锥也是双膜孔型,有下桥结构。菲利普孢囊线虫的成熟孢囊虫体较大,孢囊长度在703.5-765.4μm左右,而燕麦孢囊线虫长度相对短,长度为607.1-689.3μm。菲利普J2比燕麦孢囊J2线虫而言长度略短,在579.7-627.6μm范围内;
采用双重PCR技术对单孢囊DNA进行扩增,获得了长度为320bp和200bp的序列,分别与GenBank中已经登录的菲利普孢囊线虫和燕孢囊线虫的序列相似性达99%,进一步确认采样区单县的线虫包括燕麦孢囊线虫和菲利普孢囊线虫两种。
3、小麦品种对禾谷孢囊线虫抗性鉴定:
室外小麦抗性鉴定的盆栽试验结果表明:在6个小麦品种中,济麦22、山农28、潍麦8号、烟农对CCN胶州群体表现为感病,各品种间的感病程度不一致。山农15和济南17对CCN胶州群体表现为抗病;济南17既没有抑制CCNJ2的孵化,也没有抑制CCNJ3和J4发育,其品种抗性类型属于抗繁殖(抗雌虫形成)类型。