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研究目的:脓毒症(sepsis)是指感染引起的宿主反应失调,导致危及生命的器官功能障碍。脓毒症免疫机制复杂,经过国内外大量学者们的不懈努力,近年来人们对脓毒症的免疫机制有了更加全面的认识。目前普遍认为脓毒症的免疫功能紊乱主要表现为促炎/抗炎反应失衡。而这些免疫细胞和细胞因子,则成为了近些年有关脓毒症治疗的新靶点。甘草是中国以及东南亚地区的一种传统中草药。甘草酸(Glycyrrhizic Acid,GA)是在中药甘草的根部提取出来的一种活性物质,是三萜类化合物,具有多种药理学活性。本研究利用甘草酸的免疫调节作用,探索其在脓毒症小鼠模型中对脓毒症炎症反应的调节作用。基本研究内容:本研究主要是采用随机对照的方法,比较各个治疗组小鼠肾脏组织病理切片中肾小管损伤的情况、腹腔灌洗液中巨噬细胞的凋亡情况以及血液中IL-1β、TNF-a和HMGB1这3种炎症因子的浓度水平,初步探究甘草酸对小鼠脓毒症免疫功能的调节作用及作用的可能机制。研究方法:使用盲肠结扎穿刺法(Cecal Ligation and Puncture,CLP)建立脓毒症小鼠模型。将实验小鼠随机分为5组,假手术+安慰剂组、手术+安慰剂组、手术+高剂量药物组(25.9ml/kg)、手术+中剂量药物组(12.95ml/kg)和手术+低剂量药物组(6.475ml/kg),每组10只。手术后立即给予不同药物干预。药物干预后4小时,取小鼠眼球血,分离血清,检测血清中IL-1β,TNF-a,HMGB1的浓度,并用统计学的方法加以对比分析。取眼球血后的小鼠采用颈椎脱臼法处死,并使用生理盐水灌洗腹腔,将腹腔灌洗液使用流式细胞仪分析巨噬细胞的凋亡情况。留取双侧肾脏组织,立刻放置于4%福尔马林中固定并石蜡包埋后切片。病理切片使用HE染色,镜下观察脓毒症小鼠肾脏肾小管的损伤情况,并于评分后采用非参数秩和检验比较不同组别的评分差异。研究结果:1.小鼠肾脏组织病理切片中,假手术+安慰剂组的评分总体较低;手术+安慰剂组的评分总体较高。治疗组的评分与使用甘草酸干预剂量呈剂量依赖性下降。手术+安慰剂组>手术+低剂量药物组>手术+中剂量药物组>手术+高剂量药物组>假手术+安慰剂组(P<0.05=。2.流式细胞术结果表明,手术+安慰剂组腹腔巨噬细胞凋亡率高于假手术+安慰剂组(92.23%与22.21%,P<0.05。用药后巨噬细胞凋亡情况有所缓解,手术+低剂量药物组88.92%,P<0.05;手术+中剂量药物组78.73%,P<0.05;手术+高剂量药物组77.54%,P<0.05。3.对比5组模型血清中IL-1β的浓度,假手术+安慰剂组均值为0.217pg/ml最低。手术+安慰剂组最高,均值为0.372 pg/ml。5组组间两两比较P<0.001有统计学差异。同样的对比5组模型血清中TNF-a的浓度,假手术+安慰剂组均值为0.432pg/ml最低。手术+安慰剂组最高,均值为0.831pg/ml;且组间两两比较P<0.001有统计学差异。再对比5组模型血清中HMGB1的浓度,假手术+安慰剂组该因子水平最低,均值为213.931pg/ml。手术+安慰剂组最高,均值为498.056pg/ml;且组间两两比较P<0.001有统计学差异。进一步进行统计学分析发现,手术+治疗组的三种细胞因子的浓度均较手术+安慰剂组低,呈剂量依赖性下降(P<0.01)。结论:1.甘草酸对脓毒症小鼠肾小管上皮细胞有一定的保护作用。2.甘草酸能减少脓毒症小鼠腹腔巨噬细胞的凋亡。3.甘草酸可以明显抑制脓毒症小鼠中细胞因子的分泌,抑制程度与干预药物呈浓度依赖性。