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目的:检测复方铁线蕨颗粒总黄酮体外化学抗氧化活力和探讨其对D-半乳糖致PC12衰老细胞的保护作用及机制,并用细胞代谢组学技术进一步检测分析复方铁线蕨颗粒总黄酮对PC12衰老细胞代谢物和代谢通路的影响。方法:（1）采用水提醇沉法从复方铁线蕨颗粒中提取并纯化得到总黄酮提取物,利用紫外分光光度法测定含量。通过使用紫外分光光度法对不同浓度复方铁线蕨颗粒总黄酮的还原力,DPPH自由基、OH和O2-自由基清除率进行体外抗氧化活性测定。（2）采用MTT法检测不同浓度（8、16、32、64 g/L）D-半乳糖干预PC12细胞24、48、72 h时的细胞活力,用衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色试剂盒检测衰老细胞数目并确定建立衰老细胞模型所需的干预时间和D-半乳糖浓度。（3）使用16 g/L的D-半乳糖干预PC12细胞48h以建立细胞衰老模型,MTT法检测复方铁线蕨颗粒总黄酮对PC12细胞的细胞活力,以确定给药浓度。β-半乳糖苷酶染色法检测衰老细胞数量。采用流式细胞技术检测PC12细胞周期及细胞凋亡情况的影响。以丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脱氢酶（LDH）活力检测PC12细胞氧化应激水平。（4）采用核磁共振检测分析复方铁线蕨颗粒总黄酮对PC12衰老细胞及其培养基中的对抗衰老相关的代谢物和代谢通路的影响。结果;（1）复方铁线蕨颗粒中提取并纯化所得到的复方铁线蕨颗粒总黄酮含量为51.8%。复方铁线蕨颗粒总黄酮具有较强的还原能力和自由基清除能力,随着复方铁线蕨颗粒总黄酮浓度的增加,其对DPPH、OH和O2-自由基的清除能力和还原能力逐渐增加,且浓度为0.3 mg/m L时抗氧化作用达到最大值。（2）PC12细胞用8、16、32、64 g/L的D-半乳糖干预24、48、72 h时随着浓度的增加和干预时间的延长其存活率逐渐降低,β-半乳糖苷酶染色阳性率也明显增加,染蓝色细胞数目变多,与正常对照组比较具有统计学意义（P<0.01）,最终确定D-半乳糖诱导PC12细胞衰老模型的干预时间为48 h、浓度为16 g/L。（3）与正常对照组比较,模型组PC12细胞存活率明显降低,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞比例明显增加,细胞凋亡率和G0/G1期细胞比例以及细胞中MDA的含量和LDH的活力均明显增加,G2/M期和S期细胞比例以及细胞中SOD活力均显著降低（P<0.01）。与模型组比较,不同浓度的复方铁线蕨颗粒总黄酮组PC12细胞的存活率明显增高,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞比例明显减少,细胞凋亡率和G0/G1期细胞比例以及细胞中MDA的含量和LDH的活力均明显降低,G2/M期和S期细胞比例以及细胞中SOD的活力均显著升高（P<0.05或P<0.01）。（4）PC12衰老细胞及其培养基内涉及衰老相关的差异性代谢物共有36种:异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、脂类（LDL）、乳酸、丙氨酸、胆碱、三甲胺、脯氨酸、天冬酰胺、赖氨酸、瓜氨酸、牛磺酸、蛋氨酸、丙酮酸、谷氨酰胺、肉碱、乙酰天冬氨酸、谷胱甘肽、α-酮戊二酸、苯丙氨酸、肌酸、组氨酸、β-葡萄糖、肌醇、鲨肌醇、甘氨酸、α-葡萄糖、丝氨酸、肌酸酐、络氨酸、肌酐、鸟氨酸、甜菜碱、氨基马尿酸和不饱和脂类。复方铁线蕨颗粒总黄酮通过改善PC12细胞内的谷胱甘肽代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸的代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,丙酮酸代谢,乙醛酸和二羧酸代谢,TCA循环,半胱氨酸和蛋氨酸代谢,糖酵解和葡萄糖异生,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢,氨基酸生物合成,氨酰生物合成,精氨酸和脯氨酸代谢以及精氨酸生物合成等代谢途径的紊乱进而延缓PC12细胞衰老过程。结论:D-半乳糖能够诱导PC12细胞衰老。复方铁线蕨颗粒总黄酮使DPPH、羟基、超氧阴离子等自由基的清除率和还原力均增强,能起到较强的抗氧化效果。复方铁线蕨颗粒总黄酮通过抑制PC12细胞凋亡及细胞周期的阻滞,降低氧化应激,促进细胞增殖,改善氨基酸、糖、能量代谢等代谢紊乱以及降低参与氧化应激的代谢物含量从而改善D-半乳糖对PC12细胞的损伤,起到较强的抗衰老作用。