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抗生素抗性基因(Antibiotic Resistance Genes,ARGs)作为一种新兴污染物,不仅具有一般污染物的污染特性,还可以通过水平基因转移(Horizontal Gene Transfer,HGT)进入新的环境、微生物甚至人体内,对环境以及人体健康构成威胁。再生水补给河湖在解决水资源短缺的同时,也造成了ARGs的生态风险。为了解补水中ARGs的分布及转移,分别在不同季节采集潮白河顺义段补水场地的地表水和再生水、土壤和地下水样品,分析了ARGs(sul1、sul2、dfrA1、dfrA12、tetB、tetO、tetW、tetM)分布及环境因素的影响,通过土柱模拟及U型实验装置研究了ARGs在介质中的HGT及影响因素。对地表水样的分析发现,除了tetO及tetB外,ARGs的检出率均为100%;ARGs的丰度表现为磺胺类>甲氧苄氨嘧啶类>四环素类;sul2在研究区内相对丰度最高。夏季和秋季样品中ARGs的丰度显著高于春季和冬季。不同介质样品分析发现,地下水中ARGs丰度排序与再生水一致。总体而言,sul2、sul1和I型整合子(Class 1 integron,intI1)应为本研究区内首要关注的ARGs。地表水样品的常规指标分析发现,再生水补水对地表水水质产生了一定的影响。高通量测序结果表明地表水中以假单胞菌属(Pseudomonas)的相对丰度最高,且夏秋两季的物种多样性高于春季和冬季。统计学分析表明,intI1与ARGs普遍具有显著的相关关系,R~2最高可达0.974。多种微生物种属与ARGs相对丰度之间存在相关性,特别是夏季和秋季的不动杆菌(Acinetobacter)。主成分分析表明,不同环境介质中ARGs分布的主要影响因素包括intI1、磺胺甲恶唑、甲氧苄氨嘧啶以及重金属Cu、Zn。室内土柱模拟结果发现细胞外ARGs更容易穿过包气带进入地下水系统,对于ARGs在再生水补水入渗中可能发生的HGT需要深入研究。利用U型管实验获得了细胞外ARGs在再生水环境中的转移接合子,其转移率占总的接合转移率的比例最高可达7.29%。多重选择压力可以促进细胞外ARGs的水平基因转移,对接合子的测序发现质粒RP4体系产生接合子的群落丰度更高,转移的风险更大。同时还发现土壤表面对ARGs的吸附可以增加ARGs基因转移的几率。