白细胞介素-1β对人脐静脉内皮细胞结构及水通道蛋白-1的影响

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目的:观察白细胞介素-1β(Interleukin-1β, IL-1β)体外作用下脐静脉内皮细胞的水通道蛋白-1(aquaporins, AQP-1) mRNA转录及蛋白表达的差异、细胞凋亡情况和细胞超微结构的改变,探讨IL-1β在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)毛细血管渗漏综合征(Capillary Leak Syndrome,CLS)发生机制中的可能作用。方法:体外培养脐静脉内皮细胞,随机分为3组:时间组(T),以含20ng/ml IL-1β的培养液分别培养3h(T1)、8h(T2)、12h(T3)和24h(T4);浓度组(C),分别以含0.2ng/ml(C1)、2ng/ml(C2)和20ng/ml(C3) IL-1β的培养液培养24h;对照组,以不含IL-1β的培养液培养24h。实时荧光定量PCR和Western blot检测AQP-1mRNA及蛋白表达差异,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,电镜观察细胞超微结构的改变。结果:与对照组相比,时间组T1~T4和浓度组C1~C3的AQP-1mRNA转录水平和蛋白表达均下降(P<0.05)。IL-1β刺激后,细胞凋亡率增高,电镜下可见线粒体肿胀、空泡变性、细胞核溶解及细胞坏死,且随着刺激时间的延长或浓度的增高,这些改变更加明显。结论:IL-1β可导致AQP-1mRNA转录水平和蛋白表达降低、细胞凋亡率增高,并破坏细胞的超微结构,这是血管内皮屏障损伤的重要原因,可能与SAP毛细血管渗漏综合征的发生密切相关。
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