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目的：通过正交实验设计研究黄连总生物碱最佳提取方法；通过大鼠高架十字迷宫和明暗箱实验,观察黄连总生物碱对大鼠焦虑行为的影响,并通过测定大鼠脑内神经递质含量和研究黄连总生物碱在大鼠体内组织分布来探讨其抗焦虑作用机制。
方法：
① 黄连总生物碱提取工艺优选：采用 L16(44)正交表,以黄连总生物碱的含量为评价指标,观察乙醇浓度(A)、乙醇用量(B)、提取时间(C)和提取次数( D)四种因素对黄连总生物碱提取工艺的影响,优选出黄连总生物碱的最佳提取工艺；
② 黄连抗焦虑实验：雄性大鼠,灌胃给予不同剂量的黄连浸膏混悬液,连续灌胃5d,然后在大鼠高架十字迷宫装置、明暗箱装置上观察黄连对大鼠焦虑行为的影响。行为学实验结束后分取大鼠全脑,并采用酶联免疫法测定大鼠左脑内γ-氨基丁酸、谷氨酸和 5-羟色胺递质含量；
③ 黄连总生物碱在大鼠体内组织分布研究：行为学实验结束后,分取大鼠右脑、心、肝、脾、肺、肾、胃脏,采用高效液相色谱法测定各脏器黄连生物碱含量。
结果：
① 影响黄连提取效果的因素顺序为乙醇浓度>提取时间>乙醇用量>提取次数；黄连总生物碱最佳提取工艺为用12倍量70%的乙醇溶液回流提取3次,提取时间每次1h。最佳工艺所得黄连干浸膏提取率为25.59%,浸膏中黄连总生物碱含量达52.90%,原药材中总生物碱含量达13.54%。
② 黄连总生物碱在大鼠高架十字迷宫模型上表现出抗焦虑作用,其作用效果与地西泮相比无显著性差异。黄连总生物碱能显著降低大鼠脑内5-HT的含量,与地西泮相比无显著性差异；黄连总生物碱高、中剂量组有升高脑内GABA含量的趋势,黄连总生物碱各组有降低脑内Glu含量的趋势；黄连总生物碱各剂量组均有降低Glu/GABA的趋势。
③ 小檗碱主要分布在大鼠的胃中,其次为肝和心；脑中也有分布,只是含量相对偏低；巴马汀主要分布在胃、脾、肺和肝脏中,心、脑和肾脏中未检测到；药根碱主要分布在胃中,其次是脾脏,肾、肝、心和脑中也有少量。三种生物碱总量由大到小分别为：胃>脾>肝>心>肺>脑>肾。
结论：
① 黄连总生物碱最佳提取工艺为用12倍量70%的乙醇溶液回流提取3次,提取时间每次1h,所得黄连浸膏中生物碱总量可达50%以上；此种方法可作为黄连有效部位的提取方法,从而进行下一步的药效学实验。
② 黄连生物碱具有明显的抗焦虑作用,其抗焦虑机制与降低大鼠脑内 5-HT的含量有关；可能与提高脑内γ-GABA 的含量,降低脑内 Glu 的含量,使Glu/GABA的数值降低有关。
③ 黄连生物碱如小檗碱、药根碱等可通过血脑屏障进入神经中枢系统从而发挥其抗焦虑作用。