鸡血藤是一种传统的中药,主要含有黄酮类、酚类、甾醇类及三萜类化合物。具有多种药理活性及临床应用,可用于治疗风湿病、贫血,还具有降血压、抑制血小板聚集、抗病毒、抗肿瘤等活性。目前国外关于鸡血藤的研究很少,国内对于鸡血藤的研究相对较多。国内对于鸡血藤的研究主要偏向于两个方面:(1)直接对鸡血藤煎剂及鸡血藤提取物的药理活性的研究。(2)对鸡血藤化学成分的研究。关于鸡血藤药理活性的物质基础研究鲜有报道。本文将鸡血藤的成分分离与其抗肿瘤活性结合起来,进行了有意义的探索。1.本文以鸡血藤饮片为原料,用80%乙醇对该原料进行热回流提取,在用MTT比色法测定该粗提物具有抗肿瘤活性的基础上。首先用乙酸乙酯、正丁醇对粗提物进行分级萃取,分别得到乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物。再根据这两部分成分的极性特征,采用HSCCC法及凝胶柱层析法分别对这两部分萃取物进行分离。2.高速逆流色谱是一种新型高效的制备分离技术。本文首次将逆流色谱应用于鸡血藤成分的研究中,采用不同比例的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水体系,从鸡血藤80%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分分离纯化得到三种纯度较高的成分CS1～CS3。并通过液-质联用、紫外可见吸收光谱、核磁共振氢谱、碳谱及对照品对比分析等手段,鉴定出其中两种成分分别为甘草素(CS1)和刺芒柄花素(CS2),尚有一种化合物(CS3)的结构不能确定。3.关于鸡血藤成分的研究,目前的文献报道多集中在弱极性到中等极性的成分的研究,对于极性、强极性成分的研究因其分离难度较大,报道较少。本文采用亲水性色谱柱建立了鸡血藤中极性成分的高效液相色谱法分析方法。采用Sephadex LH-20凝胶柱层析法,以不同比例的甲醇-水溶液梯度洗脱从鸡血藤的正丁醇萃取物中分离得到了三种极性较强的成分CS4～CS6。并通过液-质联用、紫外可见吸收光谱、核磁共振氢谱、碳谱及对照品对比分析等手段,鉴定出其中的大豆苷(CS4),这是首次从鸡血藤中分离得到,此前只有大豆苷元的报道。4.对分离得到量比较大的甘草素、刺芒柄花素、大豆苷及尚未确定物质结构的CS6用MTT比色法进行抗肿瘤活性检测实验。结果发现甘草素对人肺癌细胞A549具有生长抑制作用,刺芒柄花素对人肺癌细胞A549具有微弱的促增殖作用,大豆苷及CS6虽然在低浓度下对人肺癌细胞A549的促增殖作用不明显,但在高浓度下表现为明显的促进增殖的作用。本课题建立的方法和取得的研究结果为鸡血藤抗肿瘤活性及其物质基础的深入研究奠定了一定的基础。