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[目的]观察抑郁大鼠学习记忆功能改变与海马神经元AA-COX2/5-LO表达变化的相关性;AA-COX2/5-LO通路单一干预对抑郁大鼠学习记忆功能障碍的保护作用及机制;AA-COX2/5-LO通路双重干预对抑郁大鼠学习记忆功能障碍的保护作用。[方法]1.抑郁致学习记忆障碍大鼠海马AA-COX2/5-LO信号通路表达变化:雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠40只,随机选取10只为正常对照组,余下30只给予6W慢性不可预见性温和刺激(Chronic Unpredictable Mild Stress, CUMS)后选取行为学指标有显著差异大鼠10只作为模型组。2. AA/5-LO通路干预对抑郁大鼠学习记忆功能障碍的影响:雄性SD大鼠90只,随机选取10只作为正常对照,余下80只给予6WCUMS后选取行为学指标有显著差异大鼠40只,随机分为模型组、舍曲林5mg·kg-1、咖啡酸10mg·kg-1、咖啡酸30 mg·kg-1组(n=10),给予药物灌胃21d,模型组和正常对照组给予等体积0.5% CMC-Na,于给药第22d进行行为学测试;另取雄性SD大鼠50只,随机选取10只为正常对照组,余下40只给予CUMS6W后选取行为学有显著差异的大鼠20只随机分为模型组和5-LO RNAi组后,对大鼠施行侧脑室埋管,于埋管术后5d、12d、9d、5-LO RNAi组脑室内注射15μl 5-LO RNAi慢病毒,正常组和CUMS组给予等体积空载慢病毒。在术后第26天开始进行行为学相关测试。3. AA/C0X2通路干预对抑郁大鼠学习记忆功能障碍的影响:雄性SD大鼠90只,随机选取10只作为正常对照,余下80只给予6W CUMS后选取行为学指标有显著差异大鼠40只,随机分为模型组、舍曲林5mg·kg-1美洛昔康1 mg·g-1美洛昔康3 mg·kg-1组(n=10),给予药物灌胃21d,模型组和正常对照组给予等体积CMC-Na,于给药第22d进行行为学测试;另取雄性SD大鼠60只,随机分为3组,选取10只为正常对照组注射空载病毒,20只为COX2过表达慢病毒+CUMS组,30只为空载病毒+CUMS组,大鼠施行脑室内定位注射导管埋管,术后第5天开始给予CUMS,并分别于术后第5d,12d,19d脑室内注射慢病毒15μl。给予CUMS42天后进行行为学测试,在上述分组基础上,空载病毒+CUMS组大鼠选取行为学指标有显著差异的20只分为CUMS组和COX2 RNAi慢病毒干预组,再进行慢病毒脑室内注射,一共注射3次,每次15μl,每7天注射一次。4. AA-COX2/5-LO通路联合干预对抑郁大鼠学习记忆功能障碍的影响:雄性SD大鼠100只,随机选取10只作为正常对照组,余下90只大鼠给予CUMS造模48d后选取抑郁相关行为学指标有显著差异大鼠40只,随机分为模型组、美洛昔康1 mg·kg-1咖啡酸10 mg·kg-1组,美洛昔康1 mg·kg-1+咖啡酸10 mg·kg-1组(n=10),灌胃给药21d,模型组与正常组给予等体积0.5% CMC-Na。在上述分组和干预的基础上采用旷场实验、强迫游泳和糖水消耗实验测定大鼠抑郁表征,Morris水迷宫、穿梭箱和跳台实验测定学习记忆功能;HE染色观察大鼠海马神经元形态;ELISA和生化酶学法测定大鼠海马组织IL-6、TNF-α、LTB4、PGE2、cAMP、MDA含量和SOD活性;R-T PCR检测大鼠海马COX2和5-LO mRNA表达;免疫组化检测大鼠海马SYP、PSD-95、5-HT1A、BDNF蛋白含量,Western blot检测EP3、CREB、pCREB、BDNF、COX2和5-LO蛋白含量。[结果]1.与正常对照组相比,CUMS大鼠旷场实验水平得分(P<0.01)和垂直得分(P<0.01)减少,强迫游泳不动时间增加(P<0.01),糖水消耗量下降(P<0.01);水迷宫寻台潜伏期延长(P<0.01),平台穿越次数减少(P<0.01),跳台实验下台潜伏期缩短(P<0.01),错误次数增加(P<0.01),穿梭箱被动回避次数(P<0.01)和错误次数(P<0.01)增多;海马神经元出现明显核固缩;海马IL-6(P<0.01)、TNF-α (P<0.01)、 LTB4 (P<0.01)、PGE2 (P<0.01)、 MDA (P<0.01)含量增加和SOD活性下降(P<0.01);海马COX2 (P<0.01)和5-LO (P<0.01) mRNA表达增加,COX2 (P<0.01)、5-LO (P<0.01)蛋白含量增加。2.抑制5-LO活性或RNAi减少5-LO表达能增加抑郁大鼠旷场实验水平得分(P<0.01)和垂直得分(10 mg·kg-1组P<0.05,30 mg·kg-1和RNAi组P<0.01),减少强迫游泳不动时间(P<0.01),增加糖水消耗量(P<0.01);缩短水迷宫寻台潜伏期(P<0.01),增加穿越次数(P<0.01),延长跳台实验下台潜伏期(10 mg·kg-1组P<0.05,30 mg·kg-1和RNAi组P<0.01),减少错误次数(10 mg·kg-1组P<0.05,30mg·kg-1和RNAi组P<0.01);减少海马IL-6(P<0.01)、TNF-α(P<0.01)、LTB4(10mg·kg-1和30 mg·kg-1组P<0.01,RNAi组PO.05)、MDA(10 mg·kg-1组P<0.05,30 mg·kg-1和RNAi组P<0.01)含量和增加SOD活性(10 mg·kg-1组P<0.05,30 mg·kg-1和RNAi组P<0.01);增加海马SYP(P<.05)、PSD-95 (10 mg·kg-1组P<0.05,30 mg·kg-1组P<0.01)、5-HT1A (P<0.05)和BDNF (10 mg·kg-1和30 mg·kg-1组P<0.05, RNAi组P<0.01)蛋白含量;减少5-LO mRNA (10 mg·kg-1和RNAi组P<0.05,30 mg·kg-1组P<0.01)和蛋白表达(P<0.05)。3.抑制COX2活性或RNAi减少COX2表达能增加抑郁大鼠旷场实验水平得分(1 mg·kg-1组P<0.05,3 mg·kg-1和RNAi组P<0.01)和垂直得分(P<0.01),减少强迫游泳不动时间(P<0.01),增加糖水消耗量(P<0.01);缩短水迷宫寻台潜伏期(1 mg·kg-1和RNAi组P<0.05,3 mg·kg-1组P<0.01),增加穿越次数(1 mg·kg-1组P<0.05,3 mg·kg-1和RNAi组P<0.01),延长跳台实验下台潜伏期(1 mg·kg-1组P<0.05,3 mg·kg-1和RNAi组P<0.01),减少错误次数(1 mg·kg-1组P<0.05,3 mg·kg-1和RNAi组P<0.01);减少海马IL-6(P<0.01)、TNF-α (P<0.01)、 PGE2 (3 mg·kg-1组和RNAi组P<0.01,1 mg·kg-1 P<0.05)、MDA (1 mg·kg-1组P<0.05,3 mg·kg-1和RNAi组P<0.01)含量和增加SOD活性(1 mg·kg-1组P<0.05,3 mg·kg-1和RNAi组P<0.01);增加海马SYP(1 mg·kg-1组P<0.05,3 mg·kg-1和RNAi组P<0.01)、PSD-95(1mg·kg-1组P<0.05,3 mg·kg-1和RNAi组P<0.01)、5-HT1A(1mg·kg-1和3 mg·kg-1组P<0.05,RNAi组P<0.01)和BDNF(1mg·kg-1和3 mg·kg-1组P<0.01,RNAi组P<0.05)蛋白含量;减少5-LOmRNA (1mg·kg-1组P<0.05,3 mg·kg-1和RNAi组P<0.01)和蛋白表达(1mg·kg-1组P<0 .05,3 mg·kg-1和RNAi组P<0.01); COX2 RNAi减少大鼠海马EP3蛋白表达(P<0.05),增加cAMP含量(P<0.01),增加pCREB蛋白表达(P<0.05)。与单独给予CUMS大鼠相比,在给予CUMS的基础上脑室内注射COX2过表达慢病毒能减少大鼠旷场水平和垂直得分(P<0.05),增加强迫游泳不动时间(P<0.05);增加水迷宫寻台潜伏期(P<0.05),缩短跳台下台潜伏期(P<0.05);增加海马IL-6(P<0.05)、TNF-α (P<0.05)、 PGE2 (P<0.01)、MDA (P<0.05)含量和降低SOD活性(P<0.05);减少cAMP含量(P<0.05),有增加EP3蛋白表达,减少pCREB、BDNF、 SYP、PSD-95、5-HT1A蛋白表达的趋势;有增加COX2 mRNA和蛋白表达的趋势。4.与AA/COX2或AA/5-LO单途径干预相比较,AA-COX2/5-LO通路双重干预能增加旷场水平和垂直得分(P<0.05),增加糖水消耗(P<0.05),缩短强迫游泳不动时间(P<0.05);缩短水迷宫寻台潜伏期(P<0.05),增加穿越平台次数(P<0.05),增加跳台下台潜伏期(P<0.05),减少错误次数(P<0.05);减少海马IL-6 (P<0.05)、TNF-α (P<0.05)、PGE2(咖啡酸10 mg·kg-1组P<0.01)、LTB4(美洛昔康1 mg·kg-1组P<0.01) MDA (P<0.05)含量和增加SOD活性(P<0.05);增加SYP(咖啡酸10 mg·kg-1组P<0.05)、PSD-95 (P<0.05)、5-HT1A(咖啡酸10 mg·kg-1组P<0.05)和BDNF(咖啡酸10 mg·kg-1组P<0.05)蛋白表达;减少COX2 mRNA和蛋白表达(咖啡酸10 mg·kg-1组P<0.05),减少5-LO mRNA和蛋白表达(美洛昔康1 mg·kg-1组P<0.05)。[结论]1)抑郁致学记忆功能障碍大鼠海马中AA/COX2和AA/5-LO通路表达增加。2) AA/5-LO通路激活通过增加大鼠海马炎症反应,引起氧化应激损伤,影响单胺递质系统功能和海马神经元突触可塑性导致抑郁大鼠学习记忆障碍发生,针对5-LO进行干预能改善抑郁大鼠学习记忆能力障碍。3) AA/COX2通路激活增加大鼠海马炎症反应,引起氧化应激损伤,影响单胺递质系统功能和海马神经元突触可塑性导致抑郁大鼠学习记忆障碍发生,针对COX2进行干预能改善抑郁大鼠学习记忆能力障碍。4) AA/COX2通路激活通过下游产物PGE2激动EP3,影响cAMP-CREB-BDNF信号通路,影响海马神经元突触可塑性从而导致抑郁致大鼠学习记忆障碍发生。5) AA-COX2/5-LO通路联合干预对抑郁大鼠学习记忆功能障碍的保护作用明显优于单一途径干预。