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研究目的：本文通过肿瘤睾丸抗原NY-ESO-1致敏树突状细胞，诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞对视网膜母细胞瘤细胞株HXO-RB44的杀伤作用效果。研究方法：1.自行构建NY-ESO-1基因的重组质粒pDC316/NY-ESO-1，并鉴定其在真核细胞中的表达。2.Ficoll法分离人血获得单个核细胞，通过rhGM-CSF和rhIL-4诱导培养外周血来源的DCs，重组质粒转染DCs，LPS诱导DCs成熟，成熟DCs刺激特异性CTL细胞增殖。CTL特异性杀伤HXO-RB44细胞株，通过MTT法检测CTL的增殖以及CTL对视网膜母细胞瘤细胞的杀伤作用。研究结果：1.经过检测重组载体pDC316/NY-ESO-1的目的片段序列与原基因序列完全相同，酶切鉴定结果与预期一致。2.在细胞株HXO-RB44中可以检测到NY-ESO-1基因的表达，Western-blot法和免疫荧光可检测到NY-ESO-1基因较为强烈的表达。3.经rhGM-CSF和rhIL-4成功诱导出的外周血DCs，脂质体介导重组质粒pDC316/NY-ESO-1转染诱导成熟的DCs，通过流式细胞技术检测到转染后DCs表型分子分别是HLA-DR为42.1%,CD80为54.2%，CD83为39.7%，CD86为94.8%。转染后DCs刺激产生的CTL组的增殖能力强于未经过转染DCs刺激产生的CTL组。4.通过将转染后DCs诱导的CTL，未转染DCs诱导的CTL和无DCs的淋巴细胞三组分别同细胞株HXO-RB44进行联合培养，检测到转染后DCs刺激产生的CTL对视网膜母细胞瘤细胞株的杀伤效果显著高于未经处理DCs刺激产生的CTL组和无DCs组，且效靶比为75:1(P<0.05)时杀伤率最强。结论：本实验检测到NY-ESO-1基因在细胞株HXO-RB44中较为强烈的表达，NY-ESO-1在CT抗原中是最能引起体液和细胞免疫反应的抗原，并且也是最具免疫原性的肿瘤抗原之一，通过NY-ESO-1重组质粒构建，脂质体介导重组质粒转染DCs诱导的特异性CTL产生，而此种CTL对细胞株HXO-RB44具有特异性杀伤作用，为RB免疫治疗提出了一条新的方向，然而此种方法处于探索性研究阶段，尚需进一步深入研究。