目的:探讨黄芪三种成分(黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡糖苷、芒柄花素)预处理对氧化损伤Chang Liver细胞体外增殖、抗氧化能力及CYP2E1表达的影响。方法:以Chang Liver细胞为研究对象,联苯双酯为阳性对照药物,通过H2O2诱导氧化应激进行试验。首先利用MTT法绘制Chang Liver细胞生长曲线,确定一个试验周期细胞的总培养时间。通过MTT法测定细胞存活率,选出黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡糖苷、芒柄花素、联苯双酯的安全浓度及H2O2的损伤浓度,建立Chang Liver细胞氧化损伤模型,设定空白对照组、损伤模型组、黄芪甲苷组、毛蕊异黄酮葡糖苷组、芒柄花素组、阳性对照组。倒置显微镜观察不同处理组的细胞生长状况;通过MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期,流式细胞术联合DNA ladder法检测细胞凋亡,以反映细胞的体外增殖情况;微板法检测转氨酶活性判定肝细胞损伤程度;微板法、比色法检测内源性抗氧化体系相关指标,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧水平,以反映细胞的抗氧化能力;通过分光光度法、Real-time PCR法、Western Blot法分别检测细胞CYP2E1的肝微粒体、mRNA及蛋白,从不同层面反映其表达情况。结果:从细胞生长曲线可看出18h前细胞生长缓慢,24～36h达对数生长期,36 h后细胞生长受到自身抑制。四种药物浓度在0.1～10mg·L-1范围内,均可保证细胞存活率≥90%;细胞存活率与H2O2浓度呈负相关,当H2O2浓度为250 μmol·L-1时,细胞存活率约为(52.09±4.18)%。H2O2诱导的氧化应激致使Chang Liver细胞存活率、抗氧化能力的降低,细胞凋亡率、转氨酶活性、细胞内活性氧水平、CYP2E1表达的升高,以及G0/G1期的阻滞。三种黄芪成分对细胞的预处理均可显著或极显著的提高氧化损伤细胞的存活率、抗氧化能力,降低细胞凋亡率、转氨酶活性、细胞内活性氧水平、CYP2E1的表达,并缓解G0/G1期阻滞(与损伤模型组比,P<0.05,或P<0.01),总体上与阳性对照组作用相当。结论:三种黄芪成分(黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡糖苷、芒柄花素)对H2O2诱导的Chang Liver细胞氧化应激均有显著或极显著的保护效果,细胞的氧化损伤得到明显缓解。