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目的:本课题将检测人卵巢癌SKOV3细胞株中是否有NS基因的表达,若有表达则继续应用siRNA干扰技术瞬时转染人卵巢癌SKOV3细胞,观察NS基因表达改变后对卵巢癌细胞增殖能力的影响。 方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测SKOV3细胞株中是否有NS基因的表达。若有表达则将实验分为三组,即转染NS特异性siRNA组(A)、转染阴性对照siRNA组(B)以及空白对照组(C)。应用RT-PCR方法测定三组中NS基因的表达情况,流式细胞术检测NS基因沉默后细胞增殖能力的变化情况。 结果:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结显示:卵巢癌SKOV3细胞中有NS基因的表达。荧光定量PCR显示各组mRNA相对含量:转染有效siRNA组(A):0.1378±0.0407;转染阴性siRNA组(B):0.7586±0.0486;空白对照组(C):1.0056±0.1320。三组数值比较后A组较B组、C组差异有统计学意义。流式细胞术检测各组细胞周期变化情况提示:A组的G0/G1、G2/M和S期细胞百分比分别为56.26±0.51%、7.26±0.31%、36.48±0.32%,B组分别为45.31±0.74%、7.29±0.35%、47.40±0.91%,C组分别为38.65±0.63%、7.74±0.42%、53.41±0.57%,A组较B组C组比较有显著差异,有统计学意义。 结论:荧光定量逆转录聚合酶链反应结果显示转染后三实验组的NS基因表达量不同,转染NS特异性siRNA组的NS基因表达较其他两组有明显的下降,差异有统计学意义。流式细胞术结果显示,NS基因表达下调后,SKOV3细胞株生长显著减慢,G0/G1期细胞的百分比显著升高,S期细胞减少,NS基因未来应用于卵巢癌靶基因治疗具有可行性。