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研究背景：阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease，AD)最主要的两个病理特征是β淀粉样沉积(β-amyloid, Aβ)形成的老年斑(senile plague, SP)和tau蛋白异常修饰所致的神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles, NFTs)。基础和临床研究都已经证明活性氧(reactive oxygen species, ROS)参与了AD的病理生理过程。Tau切割作为tau蛋白异常修饰的一种，被认为与AD密切相关。有研究表明，caspase-3和caspase-6在体内外试验中能够引起D421位点tau蛋白切割。因此，我们提出假说：H2O2能够通过caspases引起D421位点tau蛋白切割，caspase-3和caspase-6在其中发挥了协同作用。目的：研究在HEK293瞬时转染Tau441的细胞中，过氧化氢(hydrogenperoxide, H2O2)是否通过caspase-3和caspase-6的共同作用引起D421位点tau蛋白切割，并且进一步探索在ROS引起的D421位点tau蛋白切割中，caspase-3和caspase-6之间的相互作用。方法：细胞培养，经药物处理后，测定细胞存活能力，并测定MDA含量和SOD活性评价氧化应激模型的建立是否成功；应用免疫印迹的方法检测H2O2及抗氧化剂NAC对D421位点tau蛋白切割的影响；应用caspase-3和caspase-6的抑制剂(z-DEVD-fmk和z-VEID-fmk)以及特异性siRNA沉默研究caspase-3和caspase-6是否共同参与了H2O2诱导的D421位点tau蛋白切割，并用相关试剂盒检测caspase-3和caspase-6的活性；应用caspase-6抑制剂和siRNA抑制caspase-6之后，以免疫印迹的方法检测caspase-3的活性，探究二者之间的关系。结果：(1)用H2O2成功建立氧化应激模型。(2)在H2O2的作用下，D421位点tau蛋白切割表达量随着H2O2浓度上升呈现剂量依赖性升高；使用抗氧化剂NAC之后，tau蛋白切割表达量显著降低；(3)在H2O2作用下，使用caspase-3和caspase-6特异性抑制剂和siRNA处理细胞之后，免疫印迹实验结果表明caspase-3和caspase-6在H2O2诱导的D421位点tau蛋白切割中发挥了协同作用。Caspase-3和caspase-6活性检测证实了这一点。(4)在H2O2作用下，抑制了caspase-6之后，caspase-3的活力降低。结论和意义：caspase-3和caspase-6在H2O2引起的D421位点tau蛋白切割中发挥了协同作用，caspase-6可能通过切割caspase-3增强其活性，从而引起更多D421位点tau蛋白的切割。研究caspase-3和caspase-6的协同作用可能为今后AD的治疗提供新的靶点和方向。