论文部分内容阅读
目的Wnt/β-catenin信号通路在肝细胞癌的侵袭转移过程中扮演着重要角色。本研究通过裸鼠移植瘤成瘤实验建立移植性裸鼠肝癌模型,探讨鳖甲煎丸对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织中Wnt/β-catenin信号通路相关信号分子及靶基因表达水平的影响,明确鳖甲煎丸通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化调控肝细胞癌侵袭、转移的作用靶点,进一步探讨鳖甲煎丸抗肝细胞癌侵袭、转移的作用机制。方法1.裸鼠移植瘤成瘤实验建立移植性裸鼠肝癌模型,随机分为高(2.2g·kg-1)、中(1.1 g·kg-1)、低药物剂量组(0.55g·kg-1)、阴性对照组和正常对照组。2.免疫组织化学法检测人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织中PCNA的表达水平,TUNEL法检测人肝癌HepG2裸鼠移植瘤细胞凋亡。3.Western Blot及免疫组织化学法检测人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织中β-catenin和Tbx3的表达水平。4.Western Blot检测人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织中p53、p19ARF及MDM2的表达水平。结果1.鳖甲煎丸药物干预组人肝癌HepG2裸鼠移植瘤生长速度明显减缓,瘤体体积明显小于阴性对照组。2.鳖甲煎丸能够抑制人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织中PCNA的表达,同时可促进肝癌细胞凋亡。3.鳖甲煎丸可显著减少人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织中β-catenin和Tbx3的表达水平,可以直接降低人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织中β-catenin和Tbx3的表达水平。4.鳖甲煎丸可显著减少人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织中MDM2的表达水平,同时可促进P19ARF和p53的表达。结论1.鳖甲煎丸可显著抑制肿瘤生长,同时可促进肝癌细胞凋亡。2.鳖甲煎丸可显著减少人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织中β-catenin和Tbx3的表达水平,抑制β-catenin及Tbx3在人肝癌HepG2裸鼠移植瘤细胞中的累积。表明鳖甲煎丸可抑制β-catenin在肝癌细胞内的生成,使其入核减少,进而影响β-catenin/TCF4复合物的形成及活性,最终阻断Wnt/β-catenin信号通路的信号传递。3.鳖甲煎丸能通过影响Wnt/β-catenin通路进一步调控Tbx3的表达水平,从而影响Tbx3/pl9ARF/MDM2通路,激活抑癌基因p53,最终减少肝癌细胞的增殖并促进其凋亡,达到抗肝细胞癌的目的。总体来看,鳖甲煎丸可显著抑制肿瘤生长、促进肝癌细胞凋亡,同时可影响Wnt/β-catenin信号通路的激活与活化,干预其相关信号分子的表达,进一步调控其下游靶基因的表达,从而抑制肝细胞癌的侵袭以及转移,达到抗肿瘤的目的,这可能是鳖甲煎丸抗肿瘤的作用机制之一。