新生小鼠缺氧缺血性脑损伤后伴发白内障的研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:TigerStone
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[目 的]先天性白内障是一种严重的致盲性晶状体疾病,研究发现患儿出生时所受的危险因素与先天性白内障的发生关系密切。众所周知,围产期缺血缺氧(Hypoxia-Ischemia,HI)和由此产生的新生儿脑病(Neonatal encephalopathy,NE)会影响足月新生儿的视力。目前研究表明,白内障发生的机制与氧化应激有关,据此,本研究通过构造新生儿缺血缺氧性脑损伤(Hypoxic-Ischemic Brain Damage,HIBD)模型来模拟围生期窒息引起的新生儿缺血缺氧性脑病,其后研究了白内障、眼球发育、眼部其他损伤以及晶状体内的氧化应激水平。[方 法]采用出生9-11d的C57小鼠进行结扎左侧颈总动脉,置于8%氧分压环境中建立HIBD模型,此方法建立的HIBD模型是最经典的动物模型。造模成功后观察小鼠睁眼情况,分别统计模型组和假手术组小鼠缺血侧眼睛及对侧眼的睁眼时间。小鼠睁眼后用台式裂隙灯观察晶状体变化并拍下图片。造模后3d取材,将眼球制作石蜡切片。采用HE染色方法观察晶体的形态。取小鼠晶状体予以匀浆后取上清液检测超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性检测以及脂质氧化物丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量的检测。[结 果]造模后对于HIBD模型小鼠的脑部损伤情况可以分为:轻损组及重损组。重损组小鼠出现白内障的几率是100%。而轻损组均未发现白内障的发生。重损组小鼠缺血侧眼睛发生了白内障,假手术组、轻损组小鼠造模对侧眼无白内障,随着时间的推移,小鼠白内障持续存在并未进展。HIBD重损组小鼠缺血侧眼出现白内障的眼睛瞳孔散大,且对光反射迟钝。部分出现白内障小鼠缺血侧眼睛出现分泌物增多、角膜浑浊等情况。其中两只重损组小鼠缺血侧眼出现小眼,眼球凹陷,眼球发育受限。睁眼时间结果统计结果显示:模型组小鼠平均睁眼时间比假手术组小鼠睁眼时间延长(P<0.05),模型组小鼠缺血侧眼睁眼时间较对侧眼睁眼时间延长(P<0.05)。HE染色结果显示假手术组晶体囊膜光滑,上皮细胞排列整齐、密集,胶原纤维排列整齐,重损组和轻损组均有晶状体囊膜粗糙,上皮细胞排列紊乱,胶原纤维排列杂乱,但轻损组较重损组损伤轻。氧化应激水平检测结果:三组小鼠缺血侧眼晶状体中MDA含量,重损组明显高于轻损和假手术组,两两之间对比有统计学意义(P<0.001),模型组小鼠缺血侧眼与对侧眼比MDA含量明显增加(P<0.001);SOD酶和GSH酶活力重损组较两组明显降低,两两之间对比有统计学意义(P<0.005),模型组小鼠缺血侧眼比对侧眼酶活力明显下降(P<0.005)。[结 论]1.HIBD模型重损组小鼠缺血侧眼出现先天性白内障。2.HIBD模型组小鼠平均睁眼时间明显延长,缺血侧眼睁眼时间较对侧眼睁眼时间延长,眼球发育受限,瞳孔散大,缺血缺氧对眼发育的影响是多方面的。3.HIBD模型小鼠缺血侧眼晶状体中发生了氧化应激,抗过氧化物酶活性下降,氧化应激水平与先天性白内障的发生存在一定关联性。
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