黏菌显型原质团中脂滴的研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hulan2010
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非细胞黏菌的生活史循环过程中有四个主要阶段:子实体、游动胞、黏变形体和原质团。黏菌原质团根据形态特点分为显型原质团、隐型原质团和原始型原质团。我们通过湿室培养获得一白色显型原质团,通过实验室培养诱导得到子实体,并完成从孢子到孢子的生活史循环,最终确定为垫型双皮菌。本实验以垫型双皮菌显型原质团为实验对象,对原质团中的脂滴进行了观察和研究,实验结果如下:1、采用湿室培养法于第35天获得了黏菌的原质团,然后经过饥饿、光照进行子实体诱导,经吉林农业大学菌物研究所鉴定为垫型双皮菌,对垫型双皮菌进行生活史的观察,我们发现孢子萌发需要1-2天,萌发方式为裂式萌发,基物萌发会得到黏变形体,水中萌发则会得到游动孢,游动孢或黏变形体进一步融合为合子,释放原生质形成原质团,这一过程大约需要7天。最后原质团经过饥饿、光照诱导后菌脉合并,形成乳突约7天会形成子实体,从而完成一个完整的生活史。2、通过压片法、冰冻切片法、石蜡切片法和超薄切片法对垫型双皮菌原质团中的脂滴进行了在光学显微镜和电子显微镜下的观察。能够对动植物脂滴染色的油红O同样能够染色厡质团中的脂滴。各种方法都可以定性的看到脂滴,但是普通染色压片法不适合对脂滴数量上的统计;石蜡切片法由于二甲苯的使用会溶解一部分脂滴,对脂滴数量上的统计造成较大的误差;通过电镜显微观察法我们发现原质团中的脂滴数量丰富、排列紧密且分布非常广泛,最大限度的呈现了脂滴存在的真实状态。综合各项原因,后续脂滴研究采用冰冻切片的方法,这是超薄切片的一种改良,并且操作简单、周期短。3、不同营养方式、不同部位、不同时间条件下,对多头绒泡菌原质团的脂滴进行了统计和研究后我们发现原质团的长势和脂滴数量呈正相关。在不同碳源的条件下以麦芽糖为主要碳源时原质团的长势最佳,脂滴的数量最多体积偏大,然后依次为葡萄糖、淀粉(可溶)、蔗糖、乳糖、甘露醇。在不同氮源的条件下,以蛋白胨为主要氮源时原质团生长速度最快,脂滴较大,数量偏多,接下来依次是酵母浸膏、牛肉浸膏、天冬氨酸、尿素和半胱氨酸。在不同无机盐的处理下以氯化钙为无机盐时,原质团长势最好,脂滴较大,数量偏多,其后依次是硫酸镁、硫酸锌、氯化高铁血红素、硫酸锰和硫酸铜。最终确定以麦芽糖、蛋白胨和氯化钠优化组合培养原质团,对原质团不同部位和不同爬行时间的脂滴进行变化的动态研究。4、对不同部位下的黏菌原质团脂滴进行统计我们发现原质团的扇形前端到末端脂滴数量依次递减,说明在原质团运动过程中,是由前端带着末端不断前进,胞质环流将营养物质不断运输到前端,使前端的脂滴聚集的多,为原质团提供动力。不同时间下的原质团以刚摄食完燕麦的原质团脂滴数量最多然后随着爬行运动脂滴数量呈现递减,但是差异不显著。这一方面说明原质团在运动过程中机体不断耗能,当外界没有能量来源时,会消耗自身的能量--脂滴,不断为原质团提供所需能量,以维持机体平衡;另一方面说明虽然有递减,但原质团扇面的前缘仍具有顶端生长优势。
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