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背景氧化应激(Oxidative stress OS)是反应性氧化物与生物抗氧化剂之间的平衡破坏,造成活性氧(Reactive oxygen species ROS)浓度升高,导致细胞氧化损伤的化学反应。精子优选技术是辅助生殖技术(Assisted reproductive technology ART)的关键环节,优选操作中的多次离心会刺激精子产生过量的ROS,诱发氧化应激使精子脂质过氧化损伤及随后DNA损伤,导致辅助生殖的不良结局。体外添加抗氧化剂是降低氧化应激,从而改善妊娠结局的有效方法。白藜芦醇(resveratrol,RES)是一种可以减少ROS的生成,降低细胞的脂质过氧化损伤的天然抗氧化剂。目的在精子优选离心过程中添加RES,检测分析氧化应激损伤相关指标ROS、丙二醛(MDA)、精子DNA碎片率和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)的变化,探讨RES对精子优选过程中氧化应激损伤的保护作用。方法1.80例拟行辅助生殖的男性精液标本按照WHO5版标准分为2组:正常精液组(37)和少弱精液组(43);2.每份标本平行分为4组:空白对照、离心对照(阴性对照)组、维生素C离心(阳性对照)组和RES离心(研究)组;3.空白对照组加入PBS 50ul,不离心室温35分钟;离心对照组加入PBS 50ul,300g离心35分钟;维生素C离心对照组加入2.5mg/ml维生素C 50ul,300g离心35分钟;RES离心组加入150umol/L RES 50ul,300g离心35分钟;4.检测每组处理后精液的ROS、MDA、精子DNA碎片率和8-OHd G;结果1.二组研究对象的年龄、精液量、液化时间比较,差异均无统计学意义;精子浓度、精子活力、前向运动精子比率比较,差异均有统计学意义。2.正常精子组,空白对照组与离心对照组比较,ROS(P=0.013),MDA(P=0.024),精子DNA碎片率(P=0.012),8-OHd G(P=0.033),差异均有统计学意义;离心对照组与维生素C离心组比较,ROS(P=0.552),MDA(P=0.449),精子DNA碎片率(P=0.386),8-OHd G(P=0.545),差异均无统计学意义;离心对照组与RES离心组比较,ROS(P=0.007),MDA(P=0.004),精子DNA碎片率(P=0.018),8-OHd G(P=0.008),差异均有统计学意义。3.少弱精子组,空白对照组与离心对照组比较,ROS(P=0.002),MDA(P=0.003),精子DNA碎片率(P=0.047),8-OHd G(P=0.019),差异均有统计学意义;离心对照组与维生素C离心组比较,ROS(P=0.012),MDA(P=0.002),精子DNA碎片率(P=0.018),8-OHd G(P=0.043),差异均有统计学意义;离心对照组与RES离心组比较,ROS(P=0.033),MDA(P=0.013),精子DNA碎片率(P=0.034),8-OHd G(P=0.007),差异均有统计学意义。4.精浆ROS水平与精子8-OHd G浓度呈正相关(R~2=0.138),发现精子DNA碎片率与精子8-OHd G浓度呈正相关(R~2=0.065)。结论1.精子优选过程的离心操作会导致过量ROS产生,诱发氧化应激损伤精子的细胞膜及DNA。2.体外添加维生素C可以降低少弱精子在精子优选造成的氧化应激损伤,但对正常精液效果不明显。3.体外添加RES可以降低精子优选过程的离心操作氧化应激损伤,对正常精液亦有效。4.8-OHd G可作为精子发生氧化应激损伤DNA的检测指标。