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氨苄青霉素(Ampicillin,AMP)是一种可以治疗敏感细菌感染的β-内酰胺类半合成抗生素,因其具有抑制细菌生长繁殖、改善动物生长发育内环境等特点,被广泛应用于奶牛养殖产业。养殖产业中AMP的滥用给消费者带来诸多影响,如经常食用残留AMP的奶制品会使机体出现过敏反应、产生耐药性、甚至造成肝肾等功能的损伤。针对奶制品中AMP残留问题,许多国家和地区均制定了严格的标准。目前常用的抗生素检测方法主要包括:理化检测法、微生物检测法和免疫检测法。但是这些方法专业知识强、检测周期长、操作复杂、成本昂贵,且分别涉及不同检测领域和对象,从而使这些方法在应用普及等方面存在特定需求。因此,开发一种操作简便、灵敏度高、成本低的方法检测牛奶中的AMP残留十分必要。本研究以AMP为例,构建了基于电化学适配体传感器的牛奶中AMP残留检测方法。研究以纳米磁珠颗粒为载体偶联AMP,在微型离心管中完成AMP与适配体之间的竞争反应过程,随后,利用磁性电极本身的磁性吸附作用,将纳米磁珠固定于电极检测表面进行电化学测定,通过检测AMP与适配体竞争反应前后电化学信号的改变,可实现牛奶中AMP残留的高效检测。研究结果如下:1.纳米磁珠-电化学适配体传感技术及牛奶中氨苄青霉素检测方法研究。以纳米磁珠为载体,适配体与AMP特异性结合为基础,构建纳米磁珠-电化学适配体传感器。采用碳二亚胺交联法制备了修饰有AMP的磁珠,该磁珠可与待测样中的AMP共同竞争反应体系中的适配体和辣根过氧化物酶,随后利用磁性玻碳电极将上述磁珠吸附于电极检测表面进行电化学测定。对影响传感器性能的参数进行优化,确定最佳竞争反应时间为30 min,反应pH值为8.0,磁性信号探针使用量为50μg,测试底液中H2O2和HQ浓度均为0.5 mmol/L。最佳条件下,该传感器在1.0×10-121.0×10-8 mol/L浓度范围内氧化电流与AMP浓度呈现良好的线性关系,检测限可达1.0×10-12 mol/L。采用该方法测定市售牛奶样品中的AMP,可实现较好的精密度和回收率。2.碳纳米管掺杂纳米磁珠-电化学适配体传感技术及牛奶中氨苄青霉素检测方法研究。为增强电化学检测过程中的电子传递,在纳米磁珠-电化学适配体传感检测方法的基础上,添加羧基化多壁碳纳米管(CMWCNTs)构建碳纳米管掺杂的纳米磁珠-电化学适配体传感器。对影响传感器性能的参数进行优化,确定最佳偶联时间为90 min,CMWCNTs的使用量为1.5μg,测试底液内HQ和H2O2浓度均为1.0 mmol/L。最佳条件下,该传感器在1.0×10-131.0×10-8 mol/L浓度范围内氧化电流与AMP浓度呈现良好的线性关系,检测限可达1.0×10-13mol/L。由于掺杂了CMWCNTs,纳米磁珠-电化学适配体传感检测方法的灵敏度进一步提高,再对市售牛奶样品中AMP检测,结果也令人满意。