钙调蛋白(Calmodulin)是一种小分子酸性、耐热蛋白，等电点在3.9～4.3之间。钙调蛋白普遍存在于真核生物中，它的结构比较保守、变异小，在钙离子信号系统中起重要作用。钙调蛋白生理功能涉及面广泛：酶活性调节、激酶反应、细胞分裂与分化、细胞骨架与细胞运动、细胞分泌和渗透调节、光合作用、光形态建成、离子吸收转运、植物生殖生育、激素反应、细胞膜通道及基因表达调控等方面。迄今为止已成功地克隆了大麦、大豆、甘蓝、拟南芥、玉米等植物的钙调蛋白基因。 丹参为唇形科多年生草本植物，是我国的一种传统中药材。它在多方面有药用作用：预防心、脑血管疾病、抗肿瘤、抗炎症、抗病原微生物、抗氧化、抗衰老、促进修复再生等。我国数千年来应用传统中药治疗预防疾病，中草药是中华民族知识宝库中的重要组成部分。豇豆是一种常用蔬菜，其营养价值很高，含多种蛋白质、糖类、磷、铁、钙、和维生素及尼克酸，食物纤维等营养成分。丹参和豇豆钙调蛋白基因的克隆均未见报道。 本研究从丹参和豇豆叶片中提取总RNA。使用四种方法提取丹参总RNA：异硫氰酸胍法、CTAB硼砂法、SDS酸酚法、总核酸提取法。使用异硫氰酸胍法提取豇豆总RNA。通过比较各种提取丹参总RNA的方法，发现使用异硫氰酸胍法不仅方法简单、步骤较少，而且得到的丹参总RNA质量较高、产量较大，可以成功的应用于下游分子生物学实验。讨论了在不同条件下提取植物总RNA的影响因素，得出以下结论：研磨过程应适当增长，并保证植物材料浸泡在液氮中；整个实验过程应尽量在低温下进行，如果实验要求高温，也应适当减少植物总RNA处于高温的时间；多次乙醇洗涤有可能造成RNA降解或流失；植物总RNA提取最好采用幼嫩叶片作为材料，避免使用含杂质较多的子叶、茎等部位。 本研究克隆了丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)、豇豆(Vigna