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体细胞重编程是将小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblast，MEF)转变成诱导型多能干细胞(induced Pluripotent Stem Cell，iPSC)，是体外细胞命运转变的经典模型。细胞命运决定是个体发育过程中最基本的问题，细胞命运转变也是个体发育过程中常见的现象。细胞通过DNA甲基化将自己锁定在特殊的状态，要使细胞命运发生改变，就必须改变DNA的甲基化状态。因此，改变DNA甲基化状态是改变细胞命运的前提。在体细胞重编程中，DNA去甲基化较为明显，然而人们对其机制和重要性知之甚少。 本文对体细胞重编程的表观遗传机制进行了研究。Ten-Eleven Translocation(Tet)家族蛋白是5mC特异的加氧酶，将5mC氧化为5hmC，它和负责碱基错配修复的酶TDG一起可能介导DNA主动去甲基化。已知Tet1缺失后MEF重编程为iPS细胞的效率略微升高;Tet2缺失后MEF重编程为iPS细胞的效率有所下降;Tet3缺失对重编程没有明显的影响。我们发现Tet1，2双敲除(Tet1，2 DKO) MEF仍然可以产生iPS克隆，但是Tet1，2，3三敲除(Tet TKO) MEF完全不能产生iPS克隆。Tet TKO MEF在重编程过程中不能发生MET，控制MET的miR-200 family基因表达不被激活。Tet直接作用在miR-200 family启动子和基因组区域，将其5mC氧化为5hmC，在重编程过程中促进miR-200 family基因表达，从而促进MET。外源表达miR-200c能使Tet TKOMEF发生MET，进而使其可能发生重编程成为iPS细胞，由此可见Tet通过控制miR-200 family基因来调节MET是重编程的关键步骤之一。TDG缺失之后，MEF也不能发生MET，同样外源表达miR-200c能使TDG缺失的MEF发生MET并最终形成iPS细胞。TDG具有切除5fC/5caC的酶活，被认为与Tet共同完成DNA主动去甲基化。重编程过程中很难检测到5fC/5caC，但是当我们在Tet TKO细胞中过表达Tet2C时能在miR-4295端检测到5fC。另外，ES细胞中TDG缺失使miR-4295端5fC/5caC明显积累，表明Tet-TDG通过DNA主动去甲基化调控miR-200 family基因。在Tet1，Tet2，Tet3中，主要是Tet2在重编程过程中起着氧化5mC的作用。多能性基因启动子，如Oct4启动子，在Tet存在的情况下，5mC能被氧化成5hmC并进一步发生去甲基化;而在没有Tet的情况下，只要MEF能越过MET障碍，其启动子也可以通过依赖DNA复制的被动方式发生去甲基化。综上所述，Tet对miRNA的氧化作用，Tet-TDG所介导的DNA主动去甲基化对细胞命运转变至关重要。