硝普钠光化学反应动力学基础的研究

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硝普钠(Na2[Fe(CN)5NO]·2H2O,SNP)作为动脉和静脉血管扩张剂已经在临床上应用了40多年。在体内,硝普钠作为前药与生理巯基反应释放NO,导致血管快速舒张,血压急剧降低。硝普钠在临床上常用于心脏手术,高血压急症,心力衰竭,血管手术,儿科手术和其他急性血液动力学应用。硝普钠在体内作用时会释放氰化物阴离子,这将导致有严重毒性的氰化物在体内积累甚至中毒。但是由于硝普钠在手术中能够快速降压,所以它会继续在临床实践中作为降压药被应用。在本文中,我们通过实验探究了硝普钠的光化学反应的动力学过程,使用电子顺磁共振技术(EPR)证明了硝普钠溶液经过光诱导后会释放出NO;通过NO自由基捕捉技术测得NO自由基的三重分裂特征信号峰;定量检测不同波长光源激发条件下硝普钠溶液中释放NO的量,从而建立了定量调控释放NO的基本方法;通过研究加入硝普钠后人血清白蛋白、溶菌酶、牛血红蛋白的最大荧光发射波长处的荧光光谱强度的变化,分析硝普钠与三种蛋白的作用机制;通过研究硝普钠在不同溶剂中在不同波长条件下的光动力学过程,了解了硝普钠的光反应基本过程;研究硝普钠的二维红外相关光谱图确定了硝普钠分子中各官能团变化顺序为N-O键的振动先于C-N键开始发生变化,2074 cm-1处的峰最后发生;最后还研究了氙灯光照和无氙灯光照条件下硝普钠对肿瘤细胞生长的影响。本文研究内容主要包括五个部分:第一:介绍了硝普钠的物理化学性质、发展历史和临床作用及其在体内的代谢途径,NO的生理功能,光动力疗法的研究进展。第二:利用电子顺磁共振技术(EPR),先测定并记录硝普钠溶液在无光照条件下释放NO的情况,然后定量检测不同波长光源激发条件下硝普钠溶液中释放NO的量,所得实验数据表明改变波长可以调控硝普钠释放NO的量。第三:用傅里叶红外光谱仪检测了硝普钠的特征官能团的振动峰位置;以硝普钠中NO的伸缩振动为探针,跟踪并测定了在420 nm波长光照条件下的一维红外光谱动力学过程;测定了硝普钠在H2O和DMSO溶液中的二维红外光谱图,确定了各个特征吸收峰所处的位置和变化先后的顺序,并归属了每一个吸收峰。第四:通过傅里叶红外光谱仪分别检测了硝普钠的特征峰在加入人血清白蛋白、溶菌酶和血红蛋白后的变化,研究了三种蛋白与硝普钠的结合方式;通过观察在加入硝普钠后,人血清白蛋白、溶菌酶和牛血红蛋白的荧光光谱的变化情况,以判断硝普钠与三种蛋白之间的结合方式,之后通过静态猝灭法研究和计算它们之间的结合常数,根据所得实验数据可知,三种蛋白质与硝普钠结合的强弱顺序是:人血清白蛋白>溶菌酶>牛血红蛋白。第五:通过CCK-8法研究了氙灯光照和无氙灯光照的条件下,不同浓度的硝普钠溶液对Hela和HepG-2肿瘤细胞的增殖的抑制作用,由所得实验数据计算IC50值,比较了有光照和无光照诱导条件下,硝普钠对两种肿瘤细胞增殖抑制作用的影响。第六:对全文进行总结,并制定了下一步工作计划。
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