【摘 要】
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目的观察静态渐进性牵伸联合体外冲击波对大鼠伸直型膝关节挛缩的治疗作用以及对关节囊中MAPK/ERK通路的影响。方法将36只骨骼成熟的雄性SD大鼠随机分为对照组（C组）、固定模型组（IM组）、自然恢复组（NR组）、体外冲击波干预组（EI组）、静态渐进性牵伸干预组（SI组）、体外冲击波联合静态渐进性牵伸干预组（CI组）,每组6只。除C组外,用外固定支具将其余各组大鼠左侧膝关节完全伸直位固定4周后形成关
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目的观察静态渐进性牵伸联合体外冲击波对大鼠伸直型膝关节挛缩的治疗作用以及对关节囊中MAPK/ERK通路的影响。方法将36只骨骼成熟的雄性SD大鼠随机分为对照组（C组）、固定模型组（IM组）、自然恢复组（NR组）、体外冲击波干预组（EI组）、静态渐进性牵伸干预组（SI组）、体外冲击波联合静态渐进性牵伸干预组（CI组）,每组6只。除C组外,用外固定支具将其余各组大鼠左侧膝关节完全伸直位固定4周后形成关节挛缩。在不同时间点分别测量大鼠左侧膝关节切除肌肉前后的关节活动范围（ROM）,进而计算膝关节的总挛缩和关节源性挛缩;通过H＆E和Masson染色观察大鼠左侧膝关节前关节囊中总细胞数量、细胞形态和胶原沉积变化;通过Western blot和免疫组织化学检测前关节囊中转化生长因子-β1（TGF-β1）、成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）和细胞外信号调节激酶2（ERK2）蛋白表达水平,以及MAPK/ERK通路中上游大鼠肉瘤（RAS）蛋白和下游细胞外信号调节激酶2（ERK2）蛋白阳性表达的平均光密度值。各检测指标定量对比后评估各干预组的治疗效果。结果静态渐进性牵伸联合体外冲击波治疗更加有效的缓解了总挛缩和关节源性挛缩,较单一治疗更能促进膝关节活动范围的恢复,更加有效的减轻了前关节囊的组织病理学改变,抑制了TGF-β1、FGF-2和ERK2的高表达以及MAPK/ERK通路的过度激活。在总挛缩和关节源性挛缩的结果中,相对于IM组,NR组的总挛缩有所改善（P＜0.05）,但关节源性挛缩比较则无统计学意义（P＞0.05）;CI组的总挛缩和关节源性挛缩明显小于EI组（P＜0.05）和SI组（P＜0.05）。H＆E和Masson染色结果表明,CI组的总细胞数量和胶原沉积明显少于EI组（P＜0.05）和SI组（P＜0.05）,并且EI组与SI组比较无统计学意义（P＞0.05）。Western blot蛋白表达水平的差异比较中,3个干预组的TGF-β1、FGF-2和ERK2的表达水平较NR组均明显降低（P＜0.05）,且CI组中TGF-β1、FGF-2和ERK2的表达水平低于EI组（P＜0.05）和SI组（P＜0.05）;CI组中TGF-β1的表达水平与C组之间相比较有统计学差异（P＜0.05）,但CI组中FGF-2和ERK2的表达水平与C组之间相比较无差异（P＞0.05）。免疫组织化学染色结果显示,经过不同方式干预后各组的RAS和ERK2阳性表达的平均光密度值较NR组均明显降低（P＜0.05）,且CI组的平均光密度值低于EI组（P＜0.05）和SI组（P＜0.05）;CI组中RAS阳性表达的平均光密度值与C组之间的差异有统计学意义（P＜0.05）,但CI组中ERK2阳性表达的平均光密度值与C组之间的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论MAPK/ERK通路的过度激活参与了大鼠伸直型膝关节挛缩的形成;静态渐进性牵伸联合体外冲击波治疗可更有效地减轻固定引起的关节挛缩和关节囊纤维化,对过度激活的MAPK/ERK通路的抑制作用可能是其发挥治疗作用的潜在分子学机制之一。
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