论文部分内容阅读
抑郁症(depression)是一种危害全人类身心健康的常见情感障碍疾病,其病理机制现在仍未彻底阐明?单胺递质学说在过去占有主导地位?随着研究的深入,学者们提出了抑郁症大脑神经营养和神经可塑性受损学说,该学说得到临床研究结果的支持? 随着现代社会发展和疾病谱的改变,抑郁症对人类健康的巨大危害日益明显?据2001年世界卫生组织报告,抑郁症造成的伤残位居各类疾病之首;抑郁症造成的疾病负担列为全球疾病总负担第四位,估计到 2020 年将升至第二位?因此,寻找有效的治疗方法?阐明其作用机制,是摆在医学科学工作者们面前一项迫切而艰巨的任务?针灸疗法是祖国医学宝库中的瑰宝之一?临床实践表明,针灸疗法可以在一定程度上缓解抑郁症患者的症状,而且具有无副作用?简便易行的优点;但其产生疗效的机制有待深入阐明? 本研究选用强迫游泳和慢性应激两种抑郁症大鼠模型,旨在应用适宜频率参数,探讨电针改善抑郁模型大鼠受损神经可塑性的分子机制?首先筛选适宜的频率参数,采用强迫游泳大鼠模型,分别给予2Hz电针和100Hz 电针,进行疗效比较观察,并探讨电针在该模型上产生疗效的可能的神经化学机制?其次,采用慢性应激抑郁大鼠模型,使用优选频率2Hz电针给予治疗进行疗效观察,并探讨电针影响该模型神经可塑性可能的分子机制?现将主要结果简述如下: 1. 采用强迫游泳大鼠模型,分别给予 2Hz 电针和 100Hz 电针,观察游泳不动时间和活动性?发现2Hz组游泳不动时间明显缩短,与100Hz组?对照组相比有显著差异;100Hz组与对照组相比无明显差异?各组活动性无明显差别? 2. 在行为学改善的基础上,我们着手研究电针治疗强迫游泳模型大鼠的机制?利用高效液相-电化学检测法测定纹状体内单胺类递质及其代谢产物的含量?⑴ 2 Hz 组5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量明显降低,与100 Hz 组?对照组相比有显著性差异;100Hz 组与对照组相比无明显差异?⑵ 2 Hz 组?100 Hz 组多巴胺(DA)和 5-羟色胺(5-HT)含量明显提高,与对照组相比有显著差异;但两个电针组之间无显著差异?⑶ 2 Hz 组高香草酸(HVA)含量明显增高,与对照组相比且有显著差异,但与100 Hz 组无明显差异?⑷ 各组之间的3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)含量?去甲肾上腺素(NE)含量无明显差别? 采用放射免疫分析法测定大鼠下丘脑和垂体β-内啡肽含量?2 Hz 组?100 Hz 组下丘脑β-内啡肽含量明显提高,与对照组相比有显著差异;但两个电针组之间无显著差异?各组之间的垂体β-内啡肽含量无明显差别? 3. 使用优选频率 2Hz 电针刺激百会?印堂?三阴交等穴位,治疗慢性应激抑郁模型大鼠,观察糖水摄入量?活动性和体重变化?发现电针组糖水摄入量明显增加,接近对照组,与模型组相比有显著性差异?电针组?模型组的活动性和体重增长明显下降,与对照组相比有显著差异;但电针组与模型组相比无明显差别? 4. 在行为学改善的基础上,我们着手研究电针影响慢性应激抑郁模型大鼠神经可塑性的分子机制?首先用 Nissle 染色方法观察各组海马 CA3 区神经元形态?可见到对照组海马CA3区锥体细胞排列整齐,层次紧密,尼氏体深染;模型组 CA3区锥体细胞排列松散,<WP=5>2 电针影响慢性应激抑郁模型大鼠神经可塑性的分子机制研究细胞缺失,尼氏体浅染甚至溶解;电针组CA3区锥体细胞排列较为紧密,细胞数目有所减少,尼氏体浅染? 其次,采用免疫组化方法检测大脑皮质?下丘脑的脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸激酶B(TrkB)表达?我们发现对照组上述脑区有少量BDNF及 TrkB表达;模型组的BDNF及TrkB 表达比对照组有明显的增加,有显著性差异;而电针组BDNF及TrkB的表达较模型组及对照组均有明显的加强,有显著性差异? 采用免疫组化方法检测大脑皮质?下丘脑?海马?杏仁核的磷酸化 cAMP 反应元件结合蛋白(p-CREB)表达?对照组大脑皮质?下丘脑?海马有较多 p-CREB 表达,模型组相应脑区的p-CREB表达比对照组明显下降,有显著性差异;而电针组 p-CREB的表达较模型组有明显的增加,有显著性差异;但电针组与对照组相比无显著性差异?在杏仁核,电针组与模型组的 p-CREB 表达比对照组有明显的下降,有显著性差异;电针组与模型组之间无明显差异? 采用免疫组化方法检测大脑皮质caspase-3表达?对照组有极少的caspase-3表达,模型组有较多 caspase-3 表达,与对照组?电针组相比有显著性差异,电针组有少量caspase-3表达? 5. 用Western Blotting 方法检测大脑皮质p-CREB 表达?对照组有较低p-CREB 的表达,模型组p-CREB 表达较对照组有明显的增加,有显著性差异;而电针组p-CREB 的表达较对照组及模型均有明显的加强,有显著性差异? 本实验表明,2 Hz电针可以缩短强迫游泳大鼠的游泳不动时间,效果优于100 Hz;2 Hz电针还可以降低强迫游泳大鼠纹状体 5-HIAA 含量?提示:2 Hz 电针改善强迫游泳大鼠的抑郁行为,可能通过降低脑内5-HIAA 含量并减缓5-HT代谢?提高5-HT含量实现? 另外,2 Hz电针可以提高慢性应激抑郁模型大鼠的糖水摄入量,改善快感缺失状态?还可以增加大脑皮质?下丘脑 BDNF 及其 TrkB 表达;增加皮质?下丘脑?海马 p-CREB 表达;降低caspase-3表达?提示:电针可能通?