重庆地区环境优势PTSs污染物DBP对PC12细胞的毒性效应观察及主城区儿童行为认知发育与环境因素的相关性研究

来源 :第三军医大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:hyb916720hui
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持久性有毒物质(Persistent Toxic Substances,PTSs)能够抵抗光分解、化学分解和生物降解作用,通过大气、淡水和海洋的流动发生远距离乃至全球范围的扩散转移,表现为持久而广泛地分布于自然界中,同时具有高疏水性特征,并且能够在生物体内形成富集,干扰机体内分泌系统的功能,影响体内激素的合成、释放、转运、代谢及结合等过程,干扰血浆中正常激素水平的维持,对机体的生殖发育障碍、肿瘤发生、神经系统、免疫系统等多方面产生影响;而且此类物质可以通过食物链产生生物放大效应。目前,对PTSs的关注已经由原来的仅仅是自然环境、野生生物而扩大到今天的人类健康。针对三峡水库蓄水后,重庆地区水环境发生巨大变化,据前期曹佳、舒为群教授等研究发现长江、嘉陵江优势污染物邻苯二甲酸二丁酯(Dibutylphthalate,DBP)最高浓度达9.48μg/L,而从主城区5个自来水厂出厂水中共检测出82种有机污染物,其中以嘉陵江为水源的出厂水检测出63种,以长江为水源的出厂水检测出30种,对污染状况与人群健康的研究刻不容缓。为深入了解现阶段PTSs污染的状况及其对健康的远期危害,以及了解人群健康效应的变化状况,故而我们分别从实验室在细胞和分子水平观察三峡库区水优势污染物邻苯二甲酸二丁酯的神经细胞毒性效应,并且深入人群研究,观察环境因素与儿童行为认知发育异常的相关关系,为促进人群健康提供科学依据。方法:1.实验室研究:(1)体外培养神经细胞株PC12细胞,培养基分别含有5,12.5,25,50,100,200 mg/L DBP,作用24,48,72和96小时后,用细胞计数CCK-8法检测细胞的存活和生长;台盼蓝拒染法绘制生长曲线;(2)乳酸脱氢酶(LDH,Lactate dehydrogenase)释放检测细胞损伤程度;DNTB法测定谷光苷肽过氧化物酶(GSH-Px,Glutathione peroxidase)活性,丙二醛比色法测定丙二醛(MDA,Malondialdehyde)含量;(3)DNA凝胶电泳检测神经细胞凋亡。(4) RT-PCR检测p53 ,Bcl-2 ,Bax等凋亡相关基因表达变化情况。2.流行病学研究:以24例行为认知发育异常儿童为病例、96名行为认知发育正
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