RNAi抑制宫颈癌HeLa细胞survivin基因及其对顺铂敏感性影响的研究

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chcer1988
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤,其发病率占女性生殖系统恶性肿瘤的首位。晚期患者手术难以根治,放疗、化疗效果不理想,因此,提高化疗药物的敏感性,诱导肿瘤细胞凋亡成为改善晚期宫颈癌患者生活质量的有效措施。Survivin基因是近年来发现的一种细胞凋亡抑制基因,它位于17q25,是IAP基因家族(inhibitor of apoptosis proteins)中的一员,它在人和鼠的胚胎和胎儿期及肿瘤组织中高度表达,而在正常分化成熟组织中几乎不表达。研究证实Survivin基因的高表达与宫颈癌细胞的高耐药性密切相关。因此,抑制Survivin基因表达有可能提高宫颈癌细胞对化疗药物的敏感性,该基因有望成为宫颈癌基因治疗的靶点。RNA干扰作为近年来发现的一种高效的,广泛存在的,具有序列特异性的转录后水平的基因沉默过程。本研究利用RNAi技术抑制宫颈癌Hela细胞株Survivin基因,观察Hela细胞株的细胞凋亡、Survivin蛋白表达,及对顺铂药物敏感性的变化,为宫颈癌的基因治疗提供实验依据。 方法:以培养的宫颈癌Hela细胞株为体外研究模型,设三组进行实验:正常组,对照组,RNAi组。正常组为脂质体组;对照组为pSileneer neo siRNA Expression Vector kit中附带的阴性对照,载体内插入的片段为与人、鼠、兔的已知序列完全不相关的序列;RNAi组:利用文献提供的目标序列构建抑制survivin表达的RNAi载体(pSSURV),并转染Hela细胞。(1)半定量RT-PCR检测Survivin mRNA,Western blot法检测survivin蛋白在正常组、对照组、RNAi组中的表达情况。(2)MTT法进行DDP对各组细胞存活率作用浓度分析:转染细胞24小时后,分别以如下浓度:10、5、1、0.25、0.05、0.01、0mg/L的DDP(山东齐鲁
其他文献
中国现代诗歌自"五四"运动产生以来,深受西欧浪漫主义影响,现今的现代诗歌的发展却呈现出低俗化倾向,走入形式主义的误区。鉴于这种现象,本文提出通过深化意象的内元,提升意
目的选择较合适的大孔吸附树脂,对当归中阿魏酸进行富集纯化,提高产品质量。方法采用大孔吸附树脂对阿魏酸进行吸附及洗脱性能试验,同时采用HPLC法进行分析检测。结果筛选出
近年来,信息技术的高速发展加速了经济全球化的进程,新型的管理思想逐渐在大集团大公司内盛行,使得集团企业所面临的商业环境越发复杂,商业竞争越发严酷。对于集团企业来说,
趣玩2·米兔积木机器人控制蜂鸣器$$1.材料清单$$2.硬件连接$$IO5连接电阻,电阻的一端连接三极管的基极,三极管的集电极连接5V,三极管的射集连接蜂鸣器的正(长腿),蜂鸣器的负
报纸
文章主要运用文献计量学方法,对CNKI中有关自助图书馆的290篇论文进行了研究,从文献的增长规律、老化规律、著者情况、期刊分布、引文情况等方面进行了统计,分析了其主要特征
目的:比较腹腔镜与传统开腹肝癌切除术的短期与长期疗效,评价腹腔镜肝癌切除术的可行性与安全性。方法:收集本院从1998年8到2006年5月的31例肝癌切除术作为实验组,并按年龄、性别
在多组分气体反应实验或者吸附实验中经常需要自行配制混合气源。配制低压气体的方法很多,但是配制高压混合气的介绍非常少。针对一些条件有限的实验室需要混合气用量较大或压
介绍了篮球机器人比赛规则及篮球机器人系统结构层次,明确感知子系统的主要任务要求是对目标进行识别与定位。接着,针对目标识别过程易受光照条件影响的问题,决定采用了HSV颜
汉魏洛阳城在洛阳都城史上占有重要位置,从东汉到北魏时期,作为都城时间长达三百余年.洛阳地处天下之中,地理位置优越,这是汉魏王朝选择洛阳作为都城的地理环境因素,良好的经
随着"核心素养"的提出,它引领着我国基础教育课程改革的一个新的方向,核心素养可以界定为学生在教育过程中,逐渐形成的适应个体终身发展和社会发展需要的必备品格与关键能力