【摘 要】
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TFAR19(TF-1cellapoptosisrelatedgene19)是由该研究室利用cDNA-RDA(cDNArepresentationaldifferencesanalysis)技术,在研究去细胞因子诱地凋亡的人红白血病细胞株TF-1细胞差
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TFAR19(TF-1cellapoptosisrelatedgene19)是由该研究室利用cDNA-RDA(cDNArepresentationaldifferencesanalysis)技术,在研究去细胞因子诱地凋亡的人红白血病细胞株TF-1细胞差异表达的基因过程中,克隆出的一个人类新基因,国际人在基因命名委员会建议命名为PDCD5(programmedcelldeath5).早期的研究表明TFAR19在凋亡的过程中表达增中,并促进多种细胞的凋亡,但是其作用的分子机理尚不清楚.为了探讨TFAR19促进凋亡的分子基础,作者从以下几个方面进行了研究:首先,作者设计了TFAR19反义寡核苷酸,通过降低内源生TFAR19蛋白的表达,了解TFAR19在凋亡中的正常功能.结果表明,TFAR19反义寡核苷酸能够有效降低内源性TFAR19的表达,抑制VP16诱导致Jurkat细胞的凋亡,同时Caspase-3水解荧光底物理学活性也降低,免疫印迹结果表明Caspase-3的活化被抑制,而Caspase-9酶原的活化不受影响.这些结果提示TFAR19可能作用于Caspase-3的上游,Caspase-9的下游,它参与了Caspase-3活化的调节.根据反义寡核苷酸实验的提示,以及Caspase-3抑制剂DEVD-FMK抑制TFAR19的促进HL-60细胞的凋亡作用,提示TFAR19可能调节Caspase-3的活化.免疫共沉淀结果表明,抗TFAR19抗体的免疫共沉淀复合物中可能检测到caspase-3活化大片段,而检测不到Caspase-3酶原,这一结果说明TFAR19能够直接结合活化的Caspase-3而不是非活化的Caspase-3.
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