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金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种重要的人兽共患病原菌。由于其毒力和耐药性的不断增强,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的出现,给金黄色葡萄球菌病的防治带来极大的挑战。因此,对不同来源金黄色葡萄球菌所携带的毒力基因进行检测,并采用分子分型技术进行遗传进化分析,为流行菌株的溯源以及探寻其进化方式和传播机理具有重要意义。1.不同来源金黄色葡萄球菌毒力基因分布应用PCR方法对498株不同来源的金黄色葡萄球菌所携带的溶血素(HL α, HL β)基因、纤连蛋白结合蛋白(FnbpA、FnbpB)基因、杀白细胞毒素(PVL)基因、表皮剥脱毒素(ETA、ETB)基因、中毒休克综合症(TSST-1)基因进行检测；结果显示：至少携带一种毒力基因的菌株达82.33%(410/498)。而携带两种及两种以上毒力基因的菌株也达46.59%(233/498)。其中在人源菌株中检测出2株携带ETB基因的菌株,而环境源和动物源菌株则未检测到；在人源和动物源菌株中均检测到携带TSST-1基因的菌株(人源菌株7株,动物源菌株3株),而在环境源菌株中则未能检测到。除ETB和TSST-1基因之外,其他六种毒力基因在三种不同来源的菌株中均有分布。根据所携带毒力基因的不同,498菌株金黄色葡萄球菌被划分为30种毒力基因型。其中仅携带一种毒力基因的菌株177株,主要为携带α溶血素(HL α)的菌株。而在携带两种及两种以上毒力基因的菌株中,同时携带HL α和纤连蛋白结合蛋白A(FnbpA)基因的菌株最多,共检测出60株；其次为同时含有HL α和HL β基因的菌株,检测出55株。通过对不同来源菌株所携带的毒力基因型进行分析发现,人源菌株的毒力基因型主要为HL α, HL α-FnbpA及HL α-HL β-FnbpA三种基因型为主,而环境源菌株和动物源菌株主要以HL α, HL α-HLβ及HL α-HL β-FnbpA为主。2不同来源金黄色葡萄球菌的分子分型对242株金黄色葡萄球菌应用PCR方法,进行MRSA菌株的鉴定并进行SCCmec分型。结果共检测出65株MRSA,总的检出率为26.9%。其中,人源MRSA菌株的分离率为27.3%(30/110)；环境源MRSA菌株的分离率为28.6%(16/63)；动物源MRSA菌株的分离率为24.6%(17/69)。而在动物源MRSA菌株中,猪源MRSA菌株分离率为48%(12/25),牛源MRSA菌株分离率为50%(5/10)。65株MRSA经SCCmec分型,共发现4种SCCmec类型。其中,SCCmec Ⅱ型5株,SCCmec Ⅳ型13株,SCCmec Ⅳb型3株,SCCmec Ⅴ型28株。人源MRSA菌株多属于SCCmec Ⅲ型(n=12),其次为SCCmec Ⅴ型(n=7)；而环境源和牛源MRSA菌株全部为SCCmec Ⅴ型；对于猪源MRSA菌株,主要基因型分别为SCCmec Ⅳb型(n=3),但同时也检测到SCCmec Ⅲ型。选取250株金黄色葡萄球菌进行MLST方法分型,结果共检测出52种ST型。其中发现4个新的ST型,分别为ST2630、ST2631、ST2710和ST2711。而gmk基因和pta基因也分别新鉴定出2个新的等位基因型。在本研究中,ST630是最常见的ST型,其他几个常见的ST型依次为ST9、ST239和ST9。在MRSA和MSSA菌株中均检测到ST630、ST239、ST5、ST9、STST398型菌株的存在,提示MRSA可能是MSSA通过获得mecA基因进化而来。经eBURST分析显示,52种ST型被划分成5个克隆复合体(CC)。其中ST630,T2205,ST2711以及ST8属于CC8;ST9,ST15,ST25和ST2630属于CC15。