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近年来,我国稻曲病(Ustilaginoidea virens)的发生面积和严重程度不断增加,该病害已从水稻次要病害上升为一种稳态流行的主要病害。依靠化学杀菌剂的大量使用防治稻曲病不符合绿色农业的发展方向,生物防治具有环境友好、人畜无害、无抗药性等优点,是替代化学药剂的有效措施之一,应用前景广阔。因此筛选出对稻曲病菌具有良好抑制作用的生防菌株并探究其抑菌机理,对开发稻曲病防治新策略具有重要意义。本研究对水稻内生菌进行分离及综合筛选,并对筛选出的生防菌进行发酵条件优化,初步探究其生防机制,取得的主要研究结果如下:水稻内生生防菌的筛选鉴定:从辽宁省、吉林省和黑龙江省的10个地区采集水稻样品,共分离出190株水稻内生细菌,通过对峙培养法、孢子萌发法、菌丝生长抑制法,获得了3株具有较好抑制效果的生防菌株,其抑菌圈直径分别为32.33mm、32.25mm和32.57mm,其10%发酵液菌丝生长抑制率分别为28.61%、40.82%和30.20%,其孢子萌发抑制率分别为68.10%、76.26%和65.56%,田间防效试验中,3株内生生防菌保护作用均优于治疗作用其防效均高于对照药剂呻嗪霉素,3株生防菌均具有广谱抑菌活性。经形态学、生理生化、分子鉴定,将SDL75-4鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),将SDL9-1,SDL78-2鉴定为高地芽孢杆菌(B.altitudinis)。生防菌发酵条件的优化:对3株生防菌的发酵基础条件进行了单因素优化,通过Plackett-Burman试验设计、最陡爬坡法试验设计、以及Box-Behnken试验设计,确定3株菌拮抗稻曲病菌的最佳发酵条件,生防菌株SDL9-1的最优发酵条件为在基础培养基中加入浓度为1g/100 m L的牛肉膏,0.5 g/100 m L的硫酸铜,发酵时间为48 h;生防菌株SDL75-4的最优发酵条件为在基础培养基中加入浓度为0.3 g/100 m L的牛肉膏,0.4 g/100 m L的硫酸铜,发酵时间为48 h;生防菌株SDL78-2的最优发酵条件为在基础培养基中加入浓度为1.2 g/100 m L的牛肉膏,0.4 g/100 m L的硫酸铜,发酵时间为48 h,优化后菌株SDL9-1、SDL75-4、SDL78-2对稻曲病菌的菌丝生长抑制率分别达到了90.34%、81.64%、62.55%,较优化前分别提高了61.73%、40.82%、62.55%。3株菌生防机制的研究:3株菌均可产生纤维素酶,蛋白酶,吲哚乙酸,都能形成生物膜,不能产生嗜铁素和几丁质酶。菌株SDL75-4发酵液对可见光、温度、紫外光、p H均表现出良好的稳定性;菌株SDL9-1和SDL78-2对可见光、温度表现出良好的稳定性。菌株SDL75-4具有解钾能力,菌株SDL9-1和SDL78-2具有解磷能力。经发酵液处理后的水稻过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)、几丁质酶以及超氧阴离子自由基等的活性均呈现先增大后减小的趋势,丙二醛的含量呈现出先减小后增大的趋势。在3株内生生防菌株处理下5种水稻防御相关基因Os PR1a、Os PR1b、Os AOS2、Os PR10a和Os BIMK2的表达量均呈现先增大后减小的趋势。表明接种生防菌株后,会促使水稻相关防御基因的表达,表明3株生防菌具有诱导抗病的特性。