白术多糖提取及其对南海麻黄鸡免疫调节作用的研究

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中药白术的重要药理活性成分为白术多糖(Polysaccharide of Atractylis Macroceohala,PAM),具有促进动物生长、增强机体免疫功能等作用。本研究采用现代物理化学分析方法对白术重要药理成分PAM进行分离纯化,并对其分子组分和抗氧化性能进行研究。试验探讨PAM对南海麻黄鸡免疫功能的调节作用,试验选用健康1日龄本地南海麻黄鸡240只,按随机原则分成6组,每组40只:试验对照组(D)常规饲养;白术多糖组(T)饲料中添加PAM;环磷酰胺组(H)皮下注射环磷酰胺;环磷酰胺白术多糖组(HT)肌肉注射环磷酰胺,同时饲料中添加PAM;新城疫疫苗组(X)接种新城疫疫苗;新城疫疫苗白术多糖组(XT)接种新城疫疫苗同时饲料中添加PAM。分别于试验7d、14d、21d、28d观察各组免疫器官、免疫器官指数及TNF-α、IL-2、IL-1β、IFN-γ等免疫因子的变化,检测雏鸡接种新城疫疫苗后血清中抗体效价变化。PAM分离纯化及组分分析试验结果显示,PAM提取的最佳条件为料液比1:25,超声破壁时间40 min,水浴时间60 min,水浴温度50℃,在该条件下白术多糖提取率为25.0%。红外光谱符合多糖类物质特征。优化后的提取纯化制备工艺稳定可靠,提取率高。高效液相凝胶色谱法测定PAM数均分子量(Mn)为2.07×10~3Da,重均分子量(Mw)为3.87×10~3Da,单糖组成为甘露糖35.71%,葡萄糖64.29%。体外抗氧化试验表明,PAM浓度为1 mg/m L时,对羟基自由基清除率为45.5%。试验结果表明,采用本试验方法,PAM提取纯化工艺操作简便,提取率高,其分子结构稳定,抗氧化性能强,为PAM工业化批量生产提供科学依据。PAM对南海麻黄雏鸡免疫功能试验结果显示,T组、HT组、XT组免疫器官指数显著提高(P<0.05),HE染色镜检雏鸡脾脏组织结构、胸腺组织结构及法氏囊组织结构致密度提高,淋巴组织中细胞数量增多,淋巴细胞核质饱满,淋巴细胞外观排列整齐。TNF-α、IL-2、IL-1β、IFN-γ水平一定程度升高。日粮中添加200 mg·kg-1的PAM能够提高免疫器官指数,促进南海麻鸡重要的脾脏、胸腺和法氏囊等免疫器官细胞组织的发育,提高南海麻黄雏鸡体内细胞因子分泌能力。新城疫疫苗免疫试验结果显示,21d时,XT组(3.50±0.63)抗体水平最高,高于其他3组,差异极显著(P<0.01)。28d时,XT组(3.20±0.45)抗体水平最高,均高于其他3组,差异显著(P<0.05)。试验结果表明,白术多糖能够提高血清中鸡新城疫抗体水平,从而增强抗新城疫病毒的能力,具有提高疫苗免疫效果的作用。PAM调节免疫抑制的试验结果表明,白术多糖能够提高免疫抑制鸡免疫器官指数,改善免疫抑制引起的免疫器官形态修复,提高血清中免疫因子浓度,增强机体免疫修复功能,具有抗免疫抑制能力。
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