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研究目的：观察巨噬细胞在M1，M2不同功能极化状态下Dicer酶的表达情况；构建针对Dicer酶的干扰载体，建立Dicer酶表达抑制的巨噬细胞株；检测Dicer酶表达抑制巨噬细胞功能和M1、M2功能极化的改变，明确小分子RNA合成通路障碍对巨噬细胞功能极化的影响。研究方法：(1)通过Real time PCR和Western blot检测原代骨髓来源巨噬细胞、腹腔巨噬细胞以及巨噬细胞系RAW264.7在M1、M2不同功能状态下Dicer酶的表达情况。(2)将Dicer基因mRNA作为RNA干扰的靶区，设计特异的Dicer-siRNA干扰序列，插入含U6和H1双启动子的慢病毒载体Double-promoter pFIV-H1/U6siRNAExpression vector中，构建成抑制Dicer基因表达的RNA干扰表达载体，并转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7中，通过Real time PCR和Western blot观察干扰载体对Dicer酶表达的抑制效果；通过microRNA real time PCR检测对mir-155、mir-223的抑制效果；通过CCK8检测对细胞增殖的影响；通过凋亡试剂盒检测对细胞死亡凋亡的影响；通过Transwell小室检测细胞迁移功能；通过FITC-dextran吞噬实验检测巨噬细胞的吞噬功能。(3)通过Real time PCR和体外细胞杀菌实验检测抑制Dicer酶表达后巨噬细胞M1M2功能状态的变化。研究结果：(1) Dicer酶在巨噬细胞M1功能状态下表达降低，耐受时表达升高；在巨噬细胞M2功能状态下表达增高。(2)成功构建Dicer-siRNA慢病毒表达载体及筛选出有效干扰Dicer酶表达的稳定巨噬细胞株；CCK8及凋亡实验显示，当Dicer酶受抑制后，细胞增殖未受影响，凋亡/死亡率有所增高；迁移实验证实Dicer酶表达受抑后细胞迁移能力没有明显改变；吞噬实验证明Dicer酶抑制未影响细胞的吞噬活力。(3) Dicer酶表达下调抑制了巨噬细胞向M2功能方向极化，促进巨噬细胞向M1功能方向极化，并可增强巨噬细胞的杀菌能力。结论：（1）巨噬细胞不同功能状态下Dicer酶的表达水平各异，表明Dicer表达水平在不同极化条件下受到不同调控；（2）在巨噬细胞中抑制Dicer酶表达可增加细胞死亡和凋亡，其增殖、吞噬、迁移等基本生物行为未受明显影响（3）巨噬细胞Dicer酶表达受抑制导致细胞向M2型极化减弱，向M1型极化及杀菌作用增强。