[研究目的]本课题从分子水平探索蒙药匝迪-5对缺血再灌注损伤模型大鼠的心肌保护作用及其机制。欲用蒙医理论揭示心肌缺血再灌注损伤,通过现代科学实验方法验证蒙医临床上用于冠心病、心绞痛的常用经典方匝迪-5的心肌保护作用,为临床和科学研究提供文献参考。[研究方法]1.分组及给药:将体重200±20g的SD雄性大鼠84只,适应性饲养一周后根据体重随机分为空白组、模型组、假手术组、中药对照组、蒙药高剂量组、蒙药中剂量组、蒙药低剂量组等7组,每组12只。中药对照组灌胃给予复方丹参滴丸0.5g/kg稀释于蒸馏水,蒙药高、中、低剂量组分别灌胃给予匝迪-5,1.6g/kg、0.8g/kg、0.4g/kg稀释于蒸馏水,空白组、模型组和假手术组灌胃给予等体积蒸馏水1.0ml/100g,每日固定时间给药1次,共14天。2.模型制作及筛选:于末次给药12h后运用结扎左冠状动脉前降支法建立MIRI大鼠模型。假手术组仅穿线,不结扎。其余给药组开胸结扎大鼠冠状动脉左前降支30min后再灌注90min。3.取材与检测:记录心电图,评价模型是否成立;造模成功后取血,取心脏组织,利用ELISA法测定血清AST、LDH、LDH-1的含量以及心肌组织CK、MDA、SOD、Ca2+的含量。TTC染色法检测大鼠心肌梗死情况并计算梗死面积;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况并计算凋亡率;HE染色法观察心肌组织形态变化;免疫组化法检测心肌组织的bcl-2、Bax、caspase-3 蛋白表达;qRT-PCR法检测心肌组织的miR-30a表达。4.统计学处理:采用SPSS 22.0数据统计软件进行统计处理,所有数据均以均数±x±S)表示,选用单因素方差分析,方差不齐则用Tamhane检验。检验水准为P=0.05,P<0.05为有统计学差异。[研究结果]1.通过心电图和HE染色法检测结果表明,结扎左冠状动脉前降支进行缺血时大鼠肢体Ⅱ导联显示ST段抬高而再灌注时ST段逐步恢复正常,提示心肌缺血再灌注损伤模型成功构建。通过HE染色法观察到,模型组大鼠心肌组织细胞排列紊乱,细胞破裂、坏死,炎性细胞侵润,心肌纤维断裂,而中药组和蒙药组不同程度逆转以上组织形态变化。2.蒙药匝迪-5对MIRI模型大鼠心肌梗死面积的影响与空白对照组相比较,模型组大鼠的心肌梗死面积显著增加,有统计学意义（P<0.05）,且心肌梗死面积显著大于假手术组,有统计学意义（<0.05）。与模型组相比较,中药对照组和蒙药高、中剂量组的大鼠心肌梗死面积显著减小,有统计学意义（P<0.05）,蒙药低剂量组的大鼠心肌梗死面积呈减小趋势,但无统计学意义（P>0.05）。3.蒙药匝迪-5对MIRI模型大鼠血清中的AST、LDH、LDH-1含量的影响与空白对照组相比较,模型组大鼠血清AST、LDH、LDH-1的含量显著升高,有统计学意义（P<0.05）,且大鼠血清AST、LDH、LDH-1的含量显著高于假手术组,有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比较,中药对照组和蒙药高、中剂量组的大鼠血清AST、LDH、LDH-1的含量显著降低,有统计学意义（P<0.05）,蒙药低剂量组的大鼠血清AST、LDH、LDH-1的含量呈降低趋势,但无统计学意义（P>0.05）。4.蒙药匝迪-5对MIRI模型大鼠心肌组织CK、MDA、SOD、Ca2+含量的影响与空白对照组相比较,模型组大鼠心肌组织CK、MDA、Ca2+的含量显著升高,SOD的含量显著降低,有统计学意义（P<0.05）,大鼠心肌组织CK、MDA、Ca2+的含量显著高于假手术组,SOD的含量显著低于假手术组,有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比较,中药对照组和蒙药高、中剂量组的大鼠心肌组织CK、Ca2+的含量显著降低,SOD含量显著升高,有统计学意义（P<0.05）,且高剂量组大鼠心肌组织MDA的含量显著降低,有统计学意义（P<0.05）。蒙药中剂量组的MDA含量和低剂量组的CK、MDA、Ca2+的含量呈降低趋势,SOD的含量呈升高趋势,但无统计学意义（P>0.05）。5.蒙药匝迪-5对MIRI模型大鼠的心肌组织bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达的影响与空白对照组相比较,模型组大鼠心肌组织Bax、caspase-3蛋白表达显著升高,bcl-2蛋白表达显著降低,有统计学意义（P<0.05）,大鼠心肌组织Bax、caspase-3蛋白表达显著高于假手术组,bcl-2蛋白表达显著低于假手术组,有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比较,中药对照组和蒙药高、中剂量组大鼠的bcl-2蛋白表达显著升高,Bax、caspase-3蛋白表达显著降低,有统计学意义（P<0.05）,且蒙药低剂量组大鼠心肌组织bcl-2蛋白表达显著升高,有统计学意义（P<0.05）。蒙药低剂量组大鼠心肌组织Bax、caspase-3蛋白的表达呈降低趋势,但无统计学意义（P>0.05）。6.蒙药匝迪-5对MIRI模型大鼠的凋亡率的影响与空白对照组相比较,模型组大鼠心肌细胞凋亡率显著升高,有统计学意义（P<0.05）,大鼠心肌细胞凋亡率显著高于假手术组,有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比较,中药对照组和蒙药高、中剂量组大鼠的心肌细胞凋亡率显著降低,有统计学意义（P<0.05）。蒙药低剂量组大鼠的心肌细胞凋亡率呈降低趋势,但无统计学意义（P>0.05）。7.蒙药匝迪-5对MIRI模型大鼠miRNA30a表达的影响与空白组相比较,模型组大鼠的miRNA30a表达显著降低,有统计学意义（P<0.05）,大鼠的miRNA30a表达显著低于假手术组,有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比较,中药对照组和蒙药高、中剂量组大鼠的miRNA30a表达显著升高,有统计学意义（P<0.05）。蒙药低剂量组大鼠的miRNA30a表达呈升高趋势,但无统计学意义（P>0.05）。[结论]1.蒙药匝迪-5可减少MIRI模型大鼠血清AST、LDH的含量及心肌组织CK、Ca2+的含量,通过降低心肌细胞膜的损伤程度,降低离子通透性,抗细胞内钙超载等发挥心肌保护作用。2.蒙药匝迪-5可减少MIRI模型大鼠心肌组织MDA的含量,提高SOD的活性,能有效改善抗氧化酶的活性,提高清除氧自由基的能力,抑制氧自由基大量产生,通过抑制心肌细胞膜的脂质过氧化过程起到心肌保护作用。3.蒙药匝迪-5可提高MIRI模型大鼠心肌组织Bcl-2蛋白的表达,降低Bax蛋白的表达,减少凋亡阳性细胞数,降低凋亡率,能有效改善凋亡抑制因子,降低促凋亡因子,通过抑制细胞凋亡起到心肌保护作用。4.蒙药匝迪-5可提高MIRI模型大鼠miRNA30a的表达,进而提高凋亡抑制因子bcl-2的活性,通过基因调控减轻细胞凋亡对心肌起到保护作用。5.蒙药匝迪-5可调理气血相搏,改善气血运行,通过调补体素,调理体素,增强心功能,对心肌起到保护作用。