芜菁多糖制备、结构解析及其生物活性研究

来源 :新疆农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asdfghjkh
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芜菁(Brassica rapa L.)是常用的药食饲三用植物,具有较大的开发利用价值。当前国内外对于芜菁多糖(B rapa L.polysaccharide,BRP)的提取工艺均有耗时长、提取温度高和提取率低等缺点,导致其一级结构和生物学功能差异显著。微波-超声提取法(Microwave-Ultrasonic assisted extraction,MUAE)作为一种新技术,目前尚无关于MUAE提取BRP的报道。因此,本文以中国新疆维吾尔自治区芜菁块根为主要原料,首次将MUAE用于BRP的提取、分离、结构鉴定以及生物活性评价试验,为阐明BRP药效物质理论基础奠定依据,主要研究结果如下:(1)使用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)及多变量分析对新疆不同产地芜菁中金属元素进行分析,依据重金属元素含量水平筛选出阿图什芜菁样品。通过响应曲面法(RSM)优化获得最佳MUAE提取参数为:微波功率440 W,液料比为25 m L/g,微波-超声时间为9.7 min,提取温度为76.5℃和超声功率为292 W。该条件下,BRP的提取率为21.80%。(2)以MUAE提取的粗BRP为原料,使用大孔树脂AB-8和透析袋进行脱色、除蛋白以及小分子。所得粗BRP经DEAE-650 M和Sephadex G-100柱层析进一步纯化,得到BRP-1-1(31.38 KDa)和BRP-2-1(22.38 KDa)。主成分分析表明,BRP-1-1为中性多糖,含少量蛋白质,BRP-2-1为酸性多糖,不含蛋白质。(3)结构分析表明:BRP-1-1由摩尔比为7.62:1的甘露糖(Man)和葡萄糖(Glu)组成,其主要结构由[T-α-D-Manp-(1]n→6)-α-D-Glup-(1→4-β-D-Glup-(1→2)-α-D-Manp-(1→2)-α-D-Glup-(1→组成。BRP-2-1主要由10.89:22.25:2.70:2.27:11.98:49.92的鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)、甘露糖、葡萄糖和半乳糖(Gal)组成。构象和表面形貌分析表明,BRP-1-1是一种黏多糖,含有许多鹅卵石样颗粒,BRP-2-1结构松软,由大量空隙和孔洞组成。此外,两种多糖均具有晶体和非晶体结构,且在空间水平上包含三螺旋结构。(4)体外活性测试结果表明:芜菁多糖具有较高的抗氧化活性,在2.0 mg/m L时,BRP-1-1的DPPH+的清除率为40.31%,远高于粗BRP和BRP-2-1。考察降糖活性时,发现在中等剂量时,BRP-1-1对α-葡萄糖苷酶抑制率为44.62%,粗BRP对α-淀粉酶的抑制率为28.61%。此外,BRP-2-1在48 h内对茄链格孢菌的抑制效果最好。由此可知,芜菁多糖可以作为潜在的抗氧化、降血糖以及抗菌药物。
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