油松(Pinus tabulaeformis)在我国松属树种中占有十分重要的地位,它分布广泛,具有保持水土、美化环境的重要作用及较高的经济价值[1]。在我国,油松主要通过建立种子园的途径进行良种繁育,但种子园投资大,结实晚,面积有限,种子数量远远不能满足生产需要,而通过组织培养扩大良种繁殖系数,是解决良种快繁的主要途径之一。尽管有关油松的组织培养,国内外已有一定的研究,但所有这些研究中未见培养基中主要营养元素(氮、磷、钾)的形态配比及浓度对油松胚培养影响的报道。本文对培养基中氮、磷、钾元素的形态配比及浓度对油松离体胚培养不定芽诱导、增殖、生长及不定根形成的影响进行了较为深入、系统地研究,研究结果如下:1.培养基中氮、磷、钾元素对油松离体胚不定芽诱导、增殖和生长影响的研究本文研究发现氮、磷、钾元素对油松离体胚三个培养阶段(不定芽诱导、增殖、生长)影响的结论相同,即:1.1氮源的两种形态中,单独使用NH4+-N对油松离体胚不定芽的诱导、增殖、生长均有抑制作用,而单独使用NO3--N,不定芽的诱导、增殖、生长状况均良好,两者混用效果最好。1.2 MS培养基中的磷素浓度偏低,不利于油松离体胚不定芽的诱导、增殖和生长。1.3钾素在油松离体胚不定芽的诱导、增殖及生长过程中的浓度适应范围均较广。1.4油松离体胚不定芽诱导、增殖、生长培养过程中,氮素形态配比和磷素、钾素浓度的最佳组合均为:NO3?/NH4+比值为4、磷素浓度提高为MS培养基中磷素浓度的2倍、钾素浓度为MS培养基中钾素浓度的1～4倍均可,但从节约培养药品角度出发,钾素浓度保持MS培养基中钾素浓度不变。在此改良的MS培养基上,不定芽出现时间早,诱导率高,不易形成愈伤组织,分化出的丛生芽数多且芽色浓绿,芽体生长健壮,芽苗生长速度快,长势好。2.培养基中氮、磷、钾元素对不定根诱导的研究2.1分别接种在1/2MS和改良MS培养基上的油松离体胚,尽管在不定芽的诱导、增殖、生长及生根培养过程中的附加成分都相同,但最后只有在改良MS培养基上的无根试管苗生出根来,说明培养基中氮、磷、钾元素对油松离体胚培养不定根的诱导有着重要影响。2.2无根试管苗在含生长调节剂的培养基上培养一段时间后,必需转入不含生长调节剂的培养基,否则长期生长在含生长调节剂培养基上的无根苗不但不能生根,而且基部逐渐出现愈伤组织,后期枯死。2.3氮源的存在显著抑制不定根的形成,培养基中糖/氮比值高时促进试管苗的生