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紫花苜蓿是多年生优质豆科牧草,我国可种植地域广阔,但不同地区、不同生长年限、不同茬次及不同物候期的苜蓿营养价值有所不同。本试验采用瘤胃体外发酵技术比较研究了不同来源紫花苜蓿的瘤胃体外发酵特性,同时利用PCR-DGGE技术分析了不同物候期、不同茬次紫花苜蓿叶围细菌区系变化,探究叶围菌群变化与物候期的关系。试验以3头装有永久性瘤胃瘘管的荷斯坦奶牛为瘤胃液供体,称量1g苜蓿样品于含有10 mL瘤胃液和90 mL培养基的发酵瓶内,39℃体外发酵96 h,分别于24、48、72及96h冰浴终止发酵,测定产气量、甲烷产量、底物降解率、pH、VFA、NH3-N及MCP浓度。PCR扩增叶围细菌16S rRNA的V6-V8区,扩增产物经DGGE电泳后进行相似性分析。试验结果如下：1不同物候期刈割紫花苜蓿体外发酵特性的比较研究本试验采集新疆呼图壁2012年第一茬刈割的现蕾期、初花期及盛花期共3个苜蓿草样品,比较研究不同物候期刈割对紫花苜蓿体外发酵特性的影响。结果显示：不同物候期刈割对紫花苜蓿体外发酵产气量、底物降解率、VFA、氨态氮和菌体蛋白浓度有显著影响(P<0.05)。现蕾期苜蓿产气量、VFA浓度显著高于初花期(P<0.05)；现蕾期苜蓿底物降解率、NH3-N和MCP浓度显著高于盛花期(P<0.05)；初花期刈割苜蓿的底物降解率显著高于盛花期(P<0.05)。综合苜蓿营养指标以及体外发酵情况,以现蕾期苜蓿营养价值最佳。2不同生长年限刈割紫花苜蓿体外发酵特性的比较研究本试验采集甘肃兰州2008、2009和2011年种植,2012年刈割,即生长年限分别为4年龄、3年龄、1年龄的第一茬、第二茬及第三茬共9个苜蓿草样品,比较研究不同生长年限刈割对紫花苜蓿体外发酵特性的影响。结果表明,不同生长年限刈割对紫花苜蓿体外发酵产气量、底物降解率、VFA、氨态氮和菌体蛋白浓度有显著影响(P<0.05),第一茬中,1年龄苜蓿产气量、甲烷产量、底物降解率、NH3-N和MCP浓度最高(P<0.05),4年龄苜蓿丁酸浓度最高,甲烷产量、NH3-N和MCP浓度最低(P<0.05),3年龄苜蓿产气量、底物降解率、丁酸浓度最低(P<0.05)；第二茬中,1年龄苜蓿甲烷产量、底物降解率、丙酸、NH3-N、MCP浓度最高(P<0.05),4年龄苜蓿产气量、丁酸、总VFA浓度最高(P<0.05),3年龄苜蓿均为最低(P<0.05)；第三茬中,1年龄苜蓿产气量、甲烷产量、丙酸、MCP浓度最高(P<0.05),4年龄苜蓿底物降解率、NH3-N浓度最高(P<0.05),3年龄苜蓿均为最低(P<0.05)。综合分析营养指标及体外发酵参数表明,1年龄和4年龄苜蓿营养价值高于3年龄苜蓿。3不同地区、不同茬次刈割紫花苜蓿体外发酵特性的比较研究本试验采集宁夏固原、甘肃兰州、新疆呼图壁、江苏扬州等四个地区的第一茬、第二茬及第三茬共12个苜蓿草样品,比较研究不同地区、不同茬次刈割对紫花苜蓿体外发酵特性的影响。结果表明,不同地区、不同茬次及其互作效应对苜蓿体外发酵产气量、底物降解率、VFA、NH3-N和MCP浓度等有显著影响(P<0.05)。新疆苜蓿产气量、甲烷产量和VFA浓度最高(P<0.05),宁夏苜蓿底物降解率、NH3-N浓度最高(P<0.05)；各地区第三茬苜蓿的营养价值最高,第二茬最低,第一茬居中(P<0.05)；综合各地区、各茬次结果,以新疆第三茬和甘肃第三茬苜蓿营养价值最高,甘肃第二茬和江苏第二茬苜蓿营养价值最低。4不同物候期、不同茬次紫花苜蓿叶围细菌区系变化本试验采集江苏扬州第一茬现蕾期、初花期、盛花期及第二茬初花期苜蓿,利用PCR-DGGE技术分析了不同物候期、不同茬次紫花苜蓿叶围细菌区系的变化,探究叶围菌群变化与物候期的关系。PCR扩增叶围细菌16S rRNA的V6-V8区,扩增产物经DGGE电泳后进行相似性分析。结果表明,第一茬初花期和盛花期苜蓿条带图谱分布相似。不同物候期、不同茬次苜蓿的多样性指数差异显著(P<0.05),现蕾期和盛花期苜蓿显著高于初花期苜蓿(P<0.05)；第一茬苜蓿显著高于第二茬苜蓿(P<0.05)。结论,不同物候期及不同茬次对紫花苜蓿叶围细菌组成有明显影响。