中药黄金牡丹合剂对内毒素血症小鼠的影响

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目的内毒素血症通常由感染、烧伤、烫伤等因素诱发,进一步发展可导致感染性休克、弥散性血管内凝血(DIC),多器官功能不全综合征(MODS)、多器官功能衰竭综合征(MOF)等,甚至死亡,死亡率极高,目前尚无安全、特效治疗措施。黄金牡丹合剂(HJM)主药为黄芩、金银花、牡丹皮等,经提取其有效部位制成中药合剂,其中含有黄芩苷、绿原酸、丹皮酚等有效成分,现代药理研究表明组方中药的有效组分具有抗炎、抗血栓以及免疫调节的药理作用。本研究旨在观察HJM对内毒素血症小鼠死亡率、临床征候及组织器官的影响,并测定血清TNF-α、IL-1、IL-4、IL-6、PGE2水平和肝组织NO含量、SOD活性,初步探讨其作用机制,以期为临床治疗内毒素血症提供可能的新的治疗途径。方法实验分三部分进行:第一部分:运用“寇氏法”进行大肠杆菌内毒素LD5o测定试验,确定内毒素给药剂量。第二部分:小鼠腹腔注射大肠杆菌内毒素建立内毒素血症模型,用HJM干预治疗,观察临床征候,统计72 h动物死亡率,死亡小鼠剖检,观察心、肝、脾、肺、肾、肠道等组织病理损伤,初步确定HJM对实验动物是否具有保护作用。第三部分:在大肠杆菌内毒素注射后6 h、12 h、18 h、24 h、48 h、72h ELISA法检测血清TNF-α、IL-1、IL-4、IL-6和PGE2水平,比色法测定肝组织NO含量和SOD活性,观察HJM对细胞因子和炎症介质的影响,探讨HJM抗内毒素血症作用机制。结果1小鼠注射大肠杆菌内毒素后0.5h后开始出现不同程度的炎症反应,发病率100%,主要表现为皮毛蓬松,精神萎顿,眼目不睁,扎堆,活动明显减少,不进食水等症候,8h后开始出现死亡,死亡小鼠解剖发现皮下、心、肝、脾、肺、肾等组织病变。测得大肠杆菌内毒素LD5o为:15.479 mL/kg,LD50的95%可信限为:13.452~17.783 mL/kg。2模型组给予HJM治疗后,死亡率显著降低,其中以中剂量0.5 mL/kg效果最佳,72 h死亡率(37.5%)明显低于LPS组(68.75%),0.25 mL/kg和1 mL/kg也为有效剂量。HJM各剂量组临床征候较LPS组有一定程度的减轻,组织器官病变程度也有一定程度的改善。3 HJM组血清TNF-α、IL-6和肝组织NO含量显著低于LPS组(P<0.05或P<0.01),血清IL-4和PGE2含量显著高于LPS组(P<0.05或P<0.01),血清IL-1水平存在一定程度的降低,但无显著性差异(P>0.05),肝组织SOD活性升高不明显(P>0.05)。结论HJM能显著降低大肠杆菌内毒素所致内毒素血症小鼠死亡率,改善病情,减轻组织器官的损伤,其作用机制可能与降低血清促炎介质TNF-α、IL-6和肝组织NO水平,同时升高抗炎细胞因子IL-4水平相关。本研究发现HJM有一定的抗内毒素血症效果,为内毒素血症提供了新的治疗途径。
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