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动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）是心脑血管疾病共同的病理基础,其发病原因复杂,主要涉及脂质代谢紊乱、炎性细胞浸润、氧化应激、血管内皮细胞损伤和平滑肌细胞激活等,严重危害人类的健康。AS是血管壁对各种损伤的一种异常反应,具有经典炎症变性、渗出及增生的特点,因而炎症学说是目前被广泛认可的发病机制之一。临床上最常用的治疗动脉粥样硬化药物为他汀类降脂药,但长期使用该类药物可能造成肝损伤。因此,从中药、天然药物中寻找AS治疗药物是目前的研宄热点。中药菝葜具有利湿去浊、祛风除痹,解毒散瘀的功效,中医临床上多用于治疗盆腔炎等妇科炎症。现代药理研究表明,菝葜具有抗炎、抗氧化、降血糖、降脂、抗肿瘤等作用,本实验室前期研究亦证实菝葜黄酮及皂苷成分具有较强抗炎、抗氧化作用。基于动脉粥样硬化的发病机制及菝葜的药理作用,本课题组提出了“菝葜具有抗动脉粥样硬化作用”的假说。为了验证以上假说,本论文进行了菝葜抗动脉粥样硬化的药效学研究,并基于NLRP3炎症小体信号通路对其作用机制进行了探讨,同时对发挥作用的有效部位进行了初步筛选。本论文研究结果将为拓展菝葜的临床适应症及开发抗AS新药提供科学依据。本论文主要完成了以下研究工作:1.采用高脂饲料喂养加腹腔注射维生素D3法建立大鼠动脉粥样硬化模型,造模6周后给药治疗6周,对大鼠主动脉和肝脏组织进行HE染色和油红O染色,观察各组大鼠主动脉和肝脏的病理改变及脂质沉积;用试剂盒检测大鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C、SOD、MDA、NO、iNOS、IL-1β、IL-8、IL-10和IL-18的含量。HE染色和油红O染色结果表明,菝葜醇提物能改善血管动脉壁的结构紊乱和纹理不清,改善肝小叶结构和肝细胞脂肪变性情况,减轻大鼠主动脉和肝脏组织中脂质沉积情况,其中菝葜高剂量组作用优于阳性组。血清指标检测结果显示,与模型组相比,菝葜醇提物各剂量组均能极显著降低IL-1β、IL-8、IL-18含量及升高IL-10含量（P<0.01）,体现出很强的抗炎作用;各剂量组能明显降低AS大鼠血清中的TG、LDL-C、NO和iNOS含量（P<0.05或P<0.01）,高、中剂量组可降低HDL-C、MDA含量,明显升高SOD活力（P<0.05或P<0.01）;菝葜醇提物对血清TC水平有降低趋势但无显著影响（P>0.05）。研究结果显示,菝葜通过抗炎、抗氧化、调节血脂水平及保护细胞内皮功能多途径抗动脉粥样硬化。2.采用免疫组织化学法检测大鼠主动脉和肝脏NLRP3、IL-1β、IL-18蛋白的表达情况;采用Western blot法检测主动脉和肝脏组织中NLRP3、ASC、pro-Casepase-1、caspase-1、IL-1β、AIM2、IKKα、IκBα蛋白的表达。免疫组化结果显示,菝葜醇提物能减少主动脉NLRP3、IL-1β和IL-18蛋白的表达,能减少肝脏中NLRP3、IL-1β蛋白的表达,但对IL-18的表达无明显影响。Western blot结果显示,菝葜醇提物能通过降低主动脉和肝脏组织的NLRP3、ASC、pro-Casepase-1、caspase-1、IL-1β和AIM2蛋白的表达量,升高IκBα蛋白的表达量来起到抗炎作用,但对IKKα的表达无明显影响。研究结果显示,通过抑制NLRP3信号通路可能是菝葜抗动脉粥样硬化作用机制之一。3.氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）在动脉粥样斑块的发展过程中起关键作用。本文采用Cu2+体外诱导LDL氧化,以硫代巴比妥酸反应物（脂类物质氧化降解产物）含量为指标评价LDL被氧化修饰的程度,筛选菝葜抗动脉粥样硬化的有效部位。结果显示,菝葜醇提物、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、石油醚部位、水部位抗LDL氧化修饰的IC50值分别为43.57、29.22、22.68、293.00、487.50μg/mL,表明菝葜抗动脉粥样硬化主要有效部位为正丁醇部位和乙酸乙酯部位,二者抗LDL氧化修饰能力与阳性抗氧剂二丁基羟基甲苯(BHT,IC50为22.62μg/mL)相当。二者能明显延长LDL氧化反应潜伏期和降低LDL氧化修饰程度。本研究结果为进一步探讨菝葜抗动脉粥样硬化的药效物质奠定了基础。