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半夏[Pinellia ternata(Thunb.)Briet.]是一种重要的传统中药材,具有镇咳、祛痰、镇痛、抗生育、抗肿癌、提高记忆之活性,具有很好的发展前景。据统计,在558种中药处方中,半夏被列为使用频率最高的30种中药的第22位,市场需求很大。但自然条件下,半夏主要靠珠芽、块茎进行无性繁殖,繁殖系数低,加上耕作制度的改革和化学除草剂的使用使其野生资源遭到严重破坏。另外半夏长期无性繁殖过程中易感染病毒,其产量和药用成分含量均明显下降。本论文以半夏块茎作为材料,探讨了不同生长调节物质及浓度对半夏块茎及外植体的诱导效应,建立了半夏组织培养快速繁殖体系、筛选出诱导疏松愈伤组织的培养基,从而为半夏药用成分的测定及综合开发利用奠定了基础。主要实验结果如下:1、以半夏的块茎为外植体,接种于附加不同生在调节物质MS培养基上,均能产生愈伤组织。1.0mg/L 2,4-D有利于愈伤组织的诱导;0.5mg/L IAA有利于胚状体的产生,较适合用于小块茎的诱导;NAA的主要作用为诱导愈伤组织生根,MS+2.0mg/L NAA是诱导半夏块茎外植体的生根培养基;MS+0.5mg/L KT是较适宜的块茎诱导和增殖的培养基。2、以半夏叶片、叶柄为外植体,接种于通过单因素诱导试验和正交试验设计的不同生长调节物质及浓度的培养基中,进行诱导培养。结果表明:低浓度的生长素和细胞分裂素均有利于半夏外植体小块茎的诱导,0.2mg/L IAA和0.5mg/L 6-BA诱导率较高;当浓度达到1.0mg/L时,IAA诱导的叶片外植体能产生数量很多的小块茎,但由于数目过多影响了小块茎的萌发。KT、ZT先诱导出白色愈伤组织,再由白色愈伤组织分化出小块茎从而减慢了小块茎的萌发速度;当浓度增至2.0mg/L时,2,4-D诱导产生大量被绒毛的粗根,NAA诱导产生致密的长根,从而抑制了小块茎的产生。通过正交实验筛选出诱导半夏成苗最佳培养基:MS+0.5mg/L IAA+0.5mg/L KT+0.5mg/L6-BA。50天后对这种培养基上的再生小植株进行移栽,两周后进行统计,移栽成活率达95%以上。3、采取两因素和正交实验的方法,筛选最佳的生长调节物质配比的培养基诱导半夏的疏松愈伤组织。在两因素生长调节物质配比的试验中,3.0mg/L 2,4-D与1.0mg/L 6-BA诱导的愈伤组织状态好,生长速度较快,为疏松的愈伤组织;在正交实验中,将半夏的叶片和叶柄接种在附加1.0mg/L 2,4-D+1.0mg/L KT+1.0mg/L 6-BA的MS培养基上可诱导形成疏松愈伤组织,继代3～4次后,可进一步进行悬浮培养。