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骨关节炎（Osteoarthritis,OA）是一种以骨侵蚀、滑膜炎症、软骨破坏为特征的常见的关节退行性疾病。关节腔内不断产生的活性氮氧物质（Reactive oxygen and nitrogen species,RONS）和炎症因子是炎症持续恶化的主要因素。本课题设计了一种注射用原位多功能复合温敏水凝胶,拟通过缓慢释放透明质酸（Hyaluronic acid,HA）、富血小板血浆（Platelet-rich plasma,PRP）和铜纳米点（Copper nanodots,Cu NDs）治疗OA并修复软骨。简而言之,将溶液状态的复合温敏水凝胶HPP@Cu通过关节腔注射到OA炎症部位,由于泊洛沙姆407（Poloxamer 407,P407）材料的温敏性,溶液状态的复合凝胶在体内迅速相转变成凝胶,缓慢释放内容物并发挥疗效。其中,HA具有软骨保护和关节润滑的双重作用,Cu NDs能够高效地清除关节腔内的RONS并且逆转巨噬细胞的促炎表型,PRP能够促进软骨的修复和增殖。HPP@Cu复合温敏水凝胶结合以上各部分的优点,降低了炎症部位促炎因子的水平,延缓OA进展。通过水热还原法还原无水硫酸铜制备得到Cu NDs,并通过透射电子显微镜（Transmission electron microscopy,TEM）、动态光散射（Dynamic light scattering,DLS）对其形貌、粒径和电位进行表征。结果显示,Cu NDs具有超小的粒径,粒径均匀,粒径为5.37±0.92 nm,zeta电位为-10.63±1.37 m V。通过傅里叶红外光谱（Fourier transform infrared,FTIR）、紫外可见光谱（Ultraviolet-visible,UV-vis）和X射线衍射（X-ray diffraction,XRD）对该纳米粒进行结构表征,结果显示该纳米粒是由PVP包裹的Cu NDs组成。通过稳定性实验结果表明,Cu NDs在水、PBS、血清、完全培养基中稳定性良好。通过紫外比色法分别考察了Cu NDs对H2O2、NO?、?O2-、PTIO、NO?、ABTS?+、DPPH的自由基清除能力。随后,通过冷法混合P407、HA制备了HP温敏凝胶基质,并且通过凝胶化温度、粘度、凝胶时间对复合温敏水凝胶进行处方优化。通过简单的物理混合法将HP温敏凝胶中加入PRP、Cu NDs得到了最终复合温敏水凝胶HPP@Cu。通过扫描电子显微镜（Scanning electron microscope,SEM）观察到HPP@Cu水凝胶内部呈疏松的多孔结构。凝胶的体外溶蚀实验观察到HPP@Cu水凝胶在体外缓慢溶蚀,8天后溶蚀接近完全。体外释放实验观察到Cu NDs、HA和PRP衍射的蛋白分子（TGF-β1）能够在HPP@Cu复合温敏水凝胶中缓慢释放,并且溶蚀是决定Cu NDs释放速率的主要因素。通过比色法同样考察了HPP@Cu复合温敏水凝胶的RONS清除性能。通过MTT实验研究了Cu NDs和HPP@Cu复合温敏水凝胶对软骨细胞、RAW264.7、L929的细胞活力的影响。结果表明Cu NDs（0～50 ng/m L）、HPP@Cu水凝胶（50 ng/m L）对以上细胞的生存率几乎没有影响。通过Calcein-AM染色观察HPP@Cu水凝胶对软骨细胞的增殖效果,结果表明加入PRP的复合温敏水凝胶组较不加PRP的水凝胶组的软骨细胞数量增多。使用DCFH-DA探针和BBoxi Probe?O52探针分别考察了HPP@Cu水凝胶的体外ROS和RNS清除活性。结果表明加入Cu NDs的HPP@Cu复合水凝胶对软骨细胞和RAW264.7的RONS具有高效的清除效果。通过MTT法和Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测法考察了Cu NDs对H2O2诱导的软骨细胞凋亡的保护作用。结果表明,由于Cu NDs清除了细胞中的RONS,降低了氧化应激水平,因此显著地降低软骨细胞的凋亡率。随后通过免疫荧光实验评估了HPP@Cu复合水凝胶对M1型巨噬细胞的表型转换能力。通过巨噬细胞的表面标记物（CD206和i NOS）的荧光强度可知,HPP@Cu水凝胶能够促进巨噬细胞的抗炎表型转换,即从M1表型转换为M2表型。体内研究考察了HPP@Cu复合温敏凝胶对碘乙酸钠（Monosodium iodoacetate,MIA）诱导的大鼠OA模型的治疗作用。体内实验结果表明,HPP@Cu复合温敏水凝胶能够清除关节组织中的RONS,降低关节部位的炎症因子水平。对关节大体及其病理切片观察,结果表明经过HPP@Cu水凝胶治疗的关节部位的软骨层的没有受损或遭到骨侵蚀,HPP@Cu水凝胶能够保护软骨组织结构的完整性。此外通过免疫荧光实验观察到了与体外实验相同的促巨噬细胞M2极化的作用,表现出良好的治疗效果。总之,多功能HPP@Cu复合温敏水凝胶通过清除RONS和对巨噬细胞表型转换,改善了OA部位的炎性微环境并修复了软骨。本研究为可注射温敏水凝胶在氧化应激相关炎症性疾病中的应用提供了可靠的参考。