【摘 要】
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该文第一部分的工作是利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分段扩增汉坦病毒A9株全部L片段,用T-A克隆方法进行RCR产物克隆,利用合适的限制性内切酶位点,通过亚克隆将分段的L
【出 处】
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中国疾病预防控制中心 病毒病预防控制所
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该文第一部分的工作是利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分段扩增汉坦病毒A9株全部L片段,用T-A克隆方法进行RCR产物克隆,利用合适的限制性内切酶位点,通过亚克隆将分段的L片段连接成全长的cDNA克隆.然后利用兔网织红细胞体外转录、翻译体系,表达出完整的RNA聚合酶.选择并PCR扩增A9株L片段的一部分,将其克隆入原核表达载体pET30(a)中,利用大肠杆菌原核表达体系表达出A9株RNA聚合酶的部分蛋白.该文第二部分的工作是建立起一个由RNA聚合酶I转录介导,汉坦病毒A9株-报告基因的微复制子体系.目前,由于缺乏成熟的反向遗传操作体系,不能将汉坦病毒特定的基因区域与其功能有效地对应和联系,使得对于汉坦病毒生物学、病原学等多方面的研究都受到了限制.
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